酶法水解蕎麥清蛋白、谷蛋白制備抗氧化活性肽的研究.pdf

1、以水解度和對(duì)O2·清除率為指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)對(duì)堿性蛋白酶酶解蕎麥清蛋白、谷蛋白的工藝進(jìn)行探索，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明清蛋白酶解最佳工藝為：溫度50℃，pH值10，底物濃度20 g/L，酶底比為10％。在此條件下，水解度可達(dá)17.57％，對(duì)O2—·清除率達(dá)37.06％。谷蛋白酶解最佳工藝為：溫度45℃，pH值10，底物濃度30 g/L，酶底比為10％。此時(shí)，水解度可達(dá)20.72％，對(duì)O2—·清除率達(dá)45.27％。 清蛋白酶解產(chǎn)物通過Seph

2、adex G—25柱層析分離，得到組分Ⅰ、組分Ⅱ，測(cè)得分子量范圍分別為20.89～204.2 kDa，219～691 Da。組分Ⅱ?qū)2—·、·OH、DPPH·的清除能力較強(qiáng)，其IC50分別為：0.072mg/mL，0.26mg/mL，0.32mg/mL；組分Ⅱ可以顯著抑制H2O2誘發(fā)的小鼠紅細(xì)胞的溶血反應(yīng)，終濃度為1.56mg/mL時(shí)抑制率達(dá)42％；組分Ⅱ氨基酸組成中Glu含量最高，達(dá)12.34 mg/100mg，Asp、Arg、Gl

3、v、Lvs含量也較高。 谷蛋白酶解產(chǎn)物通過Sephadex G—25柱層析分離，得到組分Ⅰ和組分Ⅱ，測(cè)得分子量范圍分別為20.89～95.5 kDa，2138～4570 Da。組分Ⅰ對(duì)O2—·、·OH、DPPH·的清除能力較強(qiáng)，其IC50分別為：0.21mg/mL，0.24mg/mL，0.31mg/mL；組分Ⅰ可以顯著抑制H2O2誘發(fā)的小鼠紅細(xì)胞的溶血反應(yīng)，終濃度為0.6716mg/mL時(shí)抑制率達(dá)56％；組分Ⅰ氨基酸組成中Glu