抑郁大鼠模型外周血5-羥色胺相關(guān)因素與中樞的關(guān)聯(lián)探討.pdf

1、目的：探討急慢性應(yīng)激抑郁動(dòng)物模型5-羥色胺(5-HT)相關(guān)指標(biāo)(5-HT水平、5-HT受體、5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體(Arango，Underwood et al.)、色氨酸羥化酶2(TPH2)、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)在外周血與中樞的變化；探討5-羥色胺相關(guān)指標(biāo)外周血與中樞的關(guān)聯(lián)性；探討西酞普蘭對(duì)慢性應(yīng)激大鼠5-羥色胺相關(guān)指標(biāo)的影響；探討慢性應(yīng)激大鼠的認(rèn)知功能及與5-HT指標(biāo)的關(guān)聯(lián)。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)分急性電擊應(yīng)激試驗(yàn)與慢性應(yīng)激試

2、驗(yàn)兩部分。試驗(yàn)后均取大鼠血樣與腦組織(海馬、前額葉、中縫核及紋狀體)，采用高效液相色譜儀檢測(cè)(HPLC)或ELISA技術(shù)檢測(cè)血小板/血漿5-HT及BDNF水平，采用TaqMan技術(shù)檢測(cè)5-HT相關(guān)指標(biāo)的mRNA表達(dá)。
　　 第一部分：采用電擊誘導(dǎo)急性應(yīng)激模型，將16只SD大鼠隨機(jī)分為急性應(yīng)激組與對(duì)照組，每組8只，應(yīng)激組經(jīng)3天每天1次40分鐘的電擊誘導(dǎo)，采用曠場(chǎng)試驗(yàn)評(píng)價(jià)大鼠行為，安樂(lè)處死，取血樣與腦組織(海馬、前額葉、中縫核及紋狀

3、體)低溫保存后檢測(cè)。
　　 第二部分：采用慢性不可預(yù)計(jì)輕度應(yīng)激(CUMS)模型，將24只SD大鼠隨機(jī)分為3組：A對(duì)照組、B應(yīng)激不用藥組、C應(yīng)激用藥組。A組不予刺激，每天腹腔注射生理鹽水2ml；B組每天予刺激1-2種，腹腔注射生理鹽水2ml；C組每天予刺激1-2種，腹腔注射西酞普蘭10mg/kg。每周稱重，每3周測(cè)糖水偏愛(ài)性、曠場(chǎng)試驗(yàn)評(píng)價(jià)大鼠行為，6周后安樂(lè)處死，之前采用新異物體識(shí)別度評(píng)價(jià)大鼠認(rèn)知功能。取血樣與腦組織低溫保存后檢測(cè)

4、。
　　 結(jié)果：第一部分：1、電擊誘導(dǎo)的急性應(yīng)激大鼠行動(dòng)減少；2、電擊誘導(dǎo)的急性應(yīng)激大鼠外周血5-HT及BDNF水平未見(jiàn)明顯改變；3、電擊誘導(dǎo)應(yīng)激大鼠血中BDNF的mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組相比顯著降低(0.62±0.27 vs1.30±0.39，p<0.01)；BDNF的mRNA表達(dá)外周血與中樞之間未顯示相關(guān)；4、電擊誘導(dǎo)應(yīng)激大鼠5-HT2a受體的mRNA表達(dá)在海馬、中縫核、紋體體中均降低(分別是0.35±0.28vs2.00±

5、2.14，0.22±0.16 vs7.98±19.62；0.23±0.17 vs24.09±60.48)；5、血小板及血漿5-HT水平與動(dòng)物曠場(chǎng)行為數(shù)據(jù)未顯示相關(guān)；6、血小板及血漿5-HT水平與中樞5-HT相關(guān)指標(biāo)的mRNA表達(dá)未顯示相關(guān)；7、對(duì)照鼠TPH2在外周血的mRNA表達(dá)與動(dòng)物曠場(chǎng)行為可能相關(guān)(例如與動(dòng)物曠場(chǎng)移動(dòng)總距離的相關(guān)系數(shù)r=0.929)，TPH2在外周血與前額葉的表達(dá)間可能相關(guān)(r=-0.488)。
　　 第二部

6、分：1、對(duì)照組意外死亡1只；2、B組與A組及C組大鼠比較，糖水偏愛(ài)度顯著降低(均值分別為60％，73％，71％)且行為增多；3、B組及C組與A組相比，體重增長(zhǎng)明顯較少(均數(shù)分別是156.30g，132.49g，240.91g)；4、新異物體識(shí)別度C組最低，與B組相比接近顯著差異水平(A、B、C三組分別為0.65±0.15、0.60±0.26、0.33±0.33，B組與C組比較p=0.08)；5、A、B、C三組血小板5-HT水平分別為14

7、73.38±390.98、1559.00±424.41、684.15±335.6490ng/109，A組與C組、B組與C組比較有顯著差異(p<0.01)；6、血小板與血漿5-HT水平與動(dòng)物行為未顯示相關(guān)，與中樞5-HT相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)未顯示相關(guān)；7、外周血TPH2的mRNA表達(dá)與動(dòng)物行為存在關(guān)聯(lián)，TPH2的mRNA表達(dá)在外周血與前額葉及紋狀體存在關(guān)聯(lián)(r分別為0.484及0.449)；8、A、B、C三組大鼠血漿BDNF水平比較無(wú)顯著差異，

8、BDNF的mRNA表達(dá)外周血與中樞之間未顯示相關(guān)。
　　 結(jié)論：1、急慢性應(yīng)激未引起大鼠血小板與血漿5-HT水平改變，血小板與血漿5-HT水平不能作為反應(yīng)抑郁狀態(tài)的指標(biāo)，與中樞5-HT相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)也未見(jiàn)相關(guān)。2、西酞普蘭給藥降低應(yīng)激大鼠的血小板5-HT水平，血小板5-HT水平可能成為藥效評(píng)價(jià)的生物標(biāo)記物。3、外周血TPH2的mRNA表達(dá)與動(dòng)物行為存在關(guān)聯(lián)，TPH2的mRNA表達(dá)在外周血與前額葉存在關(guān)聯(lián)，提示TPH2的mRNA表