雙源CT灌注掃描對(duì)索拉非尼治療大鼠種植性肝癌療效的評(píng)估.pdf

1、第一部分:兩種移植法制備大鼠肝癌模型的比較
　　 目的:對(duì)比研究細(xì)胞懸液法及瘤塊包埋法制備大鼠肝癌模型的差異及各自特點(diǎn)。
　　 方法:
　　 1.選取6周左右，145g-160g的雄性wistar大鼠，采用開(kāi)腹經(jīng)肝注射細(xì)胞懸液法和瘤塊包埋法共建立CBRH-7919肝癌模型共60只，其中懸液法25只，瘤塊包埋法35只。計(jì)算兩種手術(shù)時(shí)間，種瘤數(shù)目。
　　 2分別于術(shù)后7天、10天、14天行MRT1、T2平掃，

2、T1掃描參數(shù)如下:TR:450ms，TE:8.6ms，層厚:2.0mm，層間距0.4mm，反轉(zhuǎn)角80，F(xiàn)OV:150mm;T2掃描參數(shù)如下，TR:1600ms;TE77.0ms;層厚:2.0mm;反轉(zhuǎn)角150°，F(xiàn)OV:150mm，矩陣:256×205。觀察兩種制模方法在成瘤率，成瘤大小、形態(tài)、短期內(nèi)腫瘤內(nèi)壞死及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等情況。隨機(jī)處死3只荷瘤大鼠，取含有腫瘤的肝組織，觀察腫瘤大體情況，固定、蠟塊包埋后常規(guī)切片，進(jìn)行HE染色和CD34及

3、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)免疫組化染色。光鏡下觀察腫瘤細(xì)胞形態(tài)及特點(diǎn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.細(xì)胞懸液法共種植25只大鼠，共計(jì)43個(gè)瘤，手術(shù)用時(shí)25.2±4.1分鐘，出血量平均小于0.2ml，術(shù)后14天死亡5只大鼠，3只大鼠體內(nèi)未見(jiàn)瘤塊，2只大鼠出現(xiàn)肝內(nèi)、腹腔及肺轉(zhuǎn)移，造模成功率為60％(15/25)，成瘤率為72.09％(31/43)。瘤塊法種植35只大鼠，共計(jì)62個(gè)瘤，手術(shù)用時(shí)10.13±2.01分鐘，出血量平均

4、約0.4ml，術(shù)后14天死亡2只，2只大鼠未見(jiàn)瘤塊形成，無(wú)大鼠出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，造模成功率88.57％(31/35)，成瘤率為88.07％(54/62)。
　　 2.腫瘤大體標(biāo)本切面觀為灰白色爛魚(yú)肉樣，與肝臟分界欠清晰。HE染色可見(jiàn)瘤細(xì)胞呈巢樣分布，細(xì)胞排列紊亂，異型性高，呈三角形或不規(guī)則形，細(xì)胞核大且著色深。CD34染色可見(jiàn)切片內(nèi)散在分布的褐色深染區(qū)，VEGF腫瘤區(qū)域細(xì)胞包漿染色較正常肝組織高。
　　 3.MR掃描術(shù)后7天

5、懸液法組未見(jiàn)明確瘤塊顯影，術(shù)后10天3只大鼠肝內(nèi)可見(jiàn)片狀混雜信號(hào)，邊界不清，術(shù)后14天17只大鼠肝內(nèi)可見(jiàn)形狀不規(guī)則，大小不一的瘤塊31個(gè)，0.74±0.52cm，4個(gè)較大的瘤塊內(nèi)可見(jiàn)液化壞死區(qū)。瘤塊組術(shù)后7天MR掃描可見(jiàn)類(lèi)圓形大小較均勻的瘤塊，0.53±0.32cm，呈長(zhǎng)T1長(zhǎng)T2信號(hào)，內(nèi)部未見(jiàn)液化壞死。
　　 結(jié)論:瘤塊包埋法較懸液注射法有更高的成瘤率，較低的壞死率及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率，腫瘤形狀規(guī)整，是適合用于索拉非尼療效評(píng)估的影像學(xué)

6、研究模型。
　　 第二部分雙源CT灌注掃描對(duì)于索拉非尼治療大鼠種植性肝癌療效的評(píng)估
　　 目的:定量分析雙源CT灌注掃描各參數(shù)在索拉非尼靶向治療動(dòng)物肝癌模型前后的變化特點(diǎn)，評(píng)估各灌注參數(shù)與MVD及VEGF之間的相關(guān)性的研究。
　　 方法:從制備的大鼠模型中篩選腫瘤形狀規(guī)則，大小相似，約0.57±0.34cm的荷瘤大鼠共計(jì)34只，隨機(jī)分為兩組，實(shí)驗(yàn)組26只，對(duì)照組8只。實(shí)驗(yàn)組經(jīng)索拉非尼20mg/d，對(duì)照組經(jīng)生理鹽水

7、20mg/d，共灌胃21天，治療前后應(yīng)用雙源CT，經(jīng)股靜脈放置的留置針以0.5ml/s的速率注射稀釋后的碘海醇(300)1ml（碘海醇∶生理鹽水=1∶5），延時(shí)2s對(duì)兩組大鼠治療分別進(jìn)行灌注掃描，記錄各項(xiàng)灌注參數(shù)。第二次掃描結(jié)束引頸處死大鼠，取瘤組織及部分正常肝組織，10％中性甲醛固定36-48小時(shí)、蠟塊包埋、切片后行HE及免疫組化檢查。
　　 結(jié)果:
　　 1.正常肝組織的時(shí)間-密度曲線(xiàn)呈緩升緩降型，曲線(xiàn)走形自然;肝癌

8、的時(shí)間-密度曲線(xiàn)表現(xiàn)為:在動(dòng)脈期迅速上升，至峰值后迅速下降，達(dá)峰時(shí)間提前。
　　 2.實(shí)驗(yàn)組腫瘤區(qū)域的CT灌注參數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果示:實(shí)驗(yàn)組大鼠治療前后肝癌區(qū)的應(yīng)用配對(duì)T檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)BF、BV、pBV、ALP有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，而MPI、PVP、HPI等值均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值≥0.05）。對(duì)照組治療前后腫瘤區(qū)域MIP、BF、BV、pBV、ALP、PVP及HPI等值應(yīng)用配對(duì)T檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)P值均大于0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　

9、3.實(shí)驗(yàn)組治療前后最大直徑的變化值為-0.302±0.234cm，對(duì)照組腫瘤治療前后最大徑之間的變化值為0.692±0.536cm。兩組變化值之間應(yīng)用兩樣本T檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.014(P＜0.05)。
　　 4.經(jīng)索拉非尼治療后實(shí)驗(yàn)組瘤組織內(nèi)的MVD數(shù)目減少，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.021，＜0.05)，對(duì)照組瘤塊內(nèi)VEGF高表達(dá)，與實(shí)驗(yàn)組治療后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.015，P＜0.05)。MIP與VEGF