冷蒿地上部分化學(xué)成分的研究.pdf

1、冷蒿（Artemisia frigida），又名小白蒿，為菊科蒿屬植物。多年生草本，有時略成半灌木狀。在我國主要分布于黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山西、陜西、寧夏、甘肅、青海、新疆、西藏等省區(qū)。中亞、西伯利亞、歐洲部分地區(qū)、北美洲的加拿大北部、美國西部、中部及南部都有分布[1]。在我國森林草原、草原、荒漠草原及干旱地區(qū)的山坡、路旁、礫質(zhì)曠地、固定沙丘、戈壁、高山草甸等地區(qū)都有分布，常常構(gòu)成山地干旱與半干旱地區(qū)植物群落的建群種或主要

2、伴生種[1]。冷蒿全草入藥，在中藥和蒙藥上都有應(yīng)用，在中藥上主要治療治黃疸型肝炎，膽囊炎，小便不利，皮膚瘙癢，濕疹，蛔蟲病和蟯蟲病。其蒙藥名“阿格”，主治吐血，鼻出血，月經(jīng)不調(diào)，外傷出血，瘡瘍，“奇哈”癥，腎熱等。有時冷蒿還做“茵陳”的代用品。在牧區(qū)為牲畜營養(yǎng)價值良好的飼料。本屬植物多含倍半萜，黃酮，香豆素，單萜及聚乙烯多炔類化合物，尤其倍半萜類化合物，其多方面的藥理活性尤為引人注目，特別是從黃花蒿（Artemisia annua L.

3、）中分離的青蒿素（artemisinin），作為一種有效的抗瘧藥物在臨床上的成功運用，更是引起了人們的對蒿屬植物的研究興趣[2]。目前，關(guān)于冷蒿化學(xué)成分的研究國內(nèi)外少有報道，已有的文獻表明其主要成分為黃酮、倍半萜以及炔類化合物[3，4，5]。因此從冷蒿中尋找新的化學(xué)成分，在此基礎(chǔ)上進一步探討同類化合物的構(gòu)效關(guān)系并以此為指導(dǎo)對其活性成分進行深入研究，具有尤為重要的意義。本課題以冷蒿的地上部分為研究對象，對其化學(xué)成分進行了系統(tǒng)的分離純化以及

4、結(jié)構(gòu)確認(rèn)，并對所得的部分單體化合物進行了廣泛的活性篩選。
　　 目的：本研究以冷蒿地上部分為研究對象，利用硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠色譜、制備薄層色譜、高效液相制備色譜以及重結(jié)晶等分離純化技術(shù)對其進行系統(tǒng)研究，尋找新的化學(xué)成分，并應(yīng)用MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H-COSY、HMQC、HMBC、NOESY等現(xiàn)代化手段完成單體化合物分子的結(jié)構(gòu)鑒定，開發(fā)自然資源，豐富中藥的多樣性；并對所得的部分單體化合物進行了廣泛的活性

5、篩選，為進一步開發(fā)利用提供依據(jù)。
　　 方法：干燥的冷蒿（Artemisia frigida）地上部分（7.17Kg）適當(dāng)粉碎后，用95％乙醇冷浸三次，浸出液加熱，加入活性炭趁熱抽濾，合并濾液減壓濃縮至粘膏狀（2 Kg），將其懸浮于飽和NaCl水溶液中，分別用石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯萃取，繼而得到石油醚部位（118 g）、二氯甲烷部位（120 g）和乙酸乙酯部位（45 g）。本研究先后對二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位采用硅膠柱色譜

6、進行初步分離，經(jīng)薄層色譜檢識后，進一步用硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠色譜、制備薄層色譜、高效液相制備色譜反復(fù)分離純化得到單體化合物。運用HR-FAB-MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H-COSY、HMQC、HMBC、NOESY等波譜學(xué)方法進行檢測，依據(jù)測定的圖譜數(shù)據(jù)分析確定單體化合物的平面結(jié)構(gòu)和立體結(jié)構(gòu)。
　　 薄層檢識中用薄層用硅膠GF254和0.5％的羧甲基纖維素鈉混勻后鋪制的硅膠薄板展開，揮盡展開劑后，先在254nm

7、的紫外燈下觀察，再浸入10％的硫酸乙醇溶液后140℃加熱顯色。
　　 分析型和制備型高效液相所用流動相均為甲醇-水兩相溶劑，梯度洗脫，分析型高效液相流動相流速為1 mL/min，制備型高效液相流動相流速為2.5 mL/min.
　　 結(jié)果：通過系統(tǒng)提取分離植物冷蒿（A.frigida）的地上部分，從中得到19個單體化合物，由于時間的限制僅確定了其中7個化合物的結(jié)構(gòu)。其中包括4個倍半萜類化合物，1個香豆素類化合物，1個二苯

8、甲酸酯類化合物和1個苯乙酮類化合物。結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果按分離得到的先后順序排列，7個化合物分別為：11，13-dihydrozaluzanin-D（1），isoscopoletin（5），1，15-Dioxoeudesm-12，6-olide（6），8α-hydroxy-11βH-11，13-dihydrodehydrocostuslactone（7），11，13-dihydrozaluzanin-C（11），terephthalic aci

9、d tricyclic ethylene ester（19），P-hydroxyacetophenone（20）。
　　 結(jié)論：本課題對蒿屬植物冷蒿（A.frigida）地上部分的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究，提取方法及提取溶劑選擇恰當(dāng)。采用了硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠色譜、制備薄層色譜、高效液相制備色譜等多種分離方法，共分離得到19個化合物，并且運用了多種現(xiàn)代波譜手段及其相關(guān)知識進行結(jié)構(gòu)鑒定，由于時間的限制僅確定了其中7個化合物的結(jié)構(gòu)。

10、其中化合物11，13-dihydrozaluzanin-D（1），11，13-dihydrozaluzanin-C（11）和terephthalic acid tricyclic ethylene ester（19）為首次從植物中分離得到?；衔飅soscopoletin（5）和p-hydroxyacetophenone（20）為首次從冷蒿中分離得到，8α-hydroxy-11βH-11，13-dihydrodehydrocostusl