環(huán)孢霉素A對大鼠主動脈移植物移植后病理變化及腫瘤壞死因子影響的研究.pdf

1、目的：
　　 同種異體主動脈移植行主動脈替換術或右室流出道重建,使心臟外科領域開辟了一種新的治療途徑。1966年Ross和Someville應用同種異體帶瓣主動脈進行右室流出道重建術獲得成功。但早期同種異體帶瓣主動脈的臨床效果并不滿意,主要表現(xiàn)為鈣化,瓣膜退變等。隨著滅菌方法和低溫保存技術的進步,同種異體主動脈的應用得到了重新重視。與人工生物瓣膜和機械瓣膜相比,同種異體帶瓣主動脈易于植入,出血少,跨瓣壓力階差小,血栓形成率、溶血

2、發(fā)生率明顯降低。目前,人們普遍關心的問題在于移植物的遠期效果。目前面臨的是同種異體主動脈移植物的退化,鈣化及梗阻等問題。免疫排斥反應在主動脈移植物中起著非常重要的作用,因此研究同種異體血管的移植免疫排斥反應不但能明確其排斥反應的機理,還能夠指導臨床工作,為尋找合適的抑制免疫排斥反應藥物提供理論依據。TNF-a是單核因子,主要由單核細胞和巨噬細胞產生,是免疫炎性反應的重要細胞因子。本研究通過建立同種異體主動脈補片移植模型,研究環(huán)孢霉素A對

3、大鼠同種異體主動脈補片移植后免疫指標腫瘤壞死因子(TNF-α)的影響,以及移植物的病理變化。
　　 材料與方法
　　 選擇健康Wistar大鼠48只作為受體,SD的大鼠20只作為供體,將Wistar大鼠隨機分為3組,每組16只。實驗組:將液氮低溫保存的SD大鼠的主動補片異位植入Wistar大鼠的腹主動脈。免疫干預組:將液氮低溫保存的SD大鼠的主動補片異位植入Wistar大鼠的腹主動脈,移植后第一天開始給予環(huán)孢霉素A,劑量

4、5mg/kg/day。對照組:假移植組,將腹主動脈縱行切開后直接吻合。移植后每組分別于術后3天、7天、14天、21天取材,每組每次處死4只大鼠。實驗大鼠用10％水合氯醛液2 ml/kg 麻醉,在無菌條件下開腹行腹主動脈取血,取血后1500rpm 離心15分鐘取血清。收集血清后置于-80℃冰箱保存,應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定其TNF-α活性。移植大鼠腹主動脈放血后,在顯微鏡下分離取出移植物。經生理鹽水沖洗后,置4％多聚甲醛固定6-2

5、4h,常規(guī)脫水,石蠟包埋,制成2μm石蠟切片,HE染色。然后觀察外膜單核細胞浸潤數(shù)。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據處理,計量資料以均數(shù)±標準差((x)±s)表示,組間比較采用重復測量數(shù)據的方差分析,兩兩比較用多重比較t檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 1、病理變化:實驗組可明顯看到大量單核細胞浸潤,與對照組相比有顯著性差異(P<0.05)。免疫干預組也可見明顯單核細胞浸潤,但實驗組與之相比

6、有明顯差異(P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。
　　 2、TNF-α,活性變化:實驗組可明顯看到TNF-α活性明顯升高,與對照組相比有顯著性差異(P<0.05)。免疫干預組也可見TNF-α活性明顯升高,但實驗組與之相比有明顯差異(P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結論：
　　 1、低溫保存同種異體主動脈移植物移植后有明確的免疫排斥反應發(fā)生。
　　 2、環(huán)孢霉素A對主動脈異體移植物移植后單核細胞的浸