RNA干擾介導(dǎo)肌肉環(huán)指蛋白-1(MuRFl)基因下調(diào)延緩失神經(jīng)骨骼肌萎縮的基礎(chǔ)研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩32頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的：應(yīng)用RNA干擾技術(shù)體外抑制大鼠MuRF1基因表達(dá)的效果，以期篩選出針對(duì)MuRF1基因抑制效果最佳的siRNA重組質(zhì)粒。
　　方法：根據(jù)大鼠MuRF1基因的mRNA序列，設(shè)計(jì)四組干擾序列，即siRNAMuRF1-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，利用lipofactamine2000轉(zhuǎn)染試劑將siRNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大鼠成肌細(xì)胞系L6，于轉(zhuǎn)染后48h與72h，采用實(shí)時(shí)定量PCR和Westernblot或免疫印跡檢測(cè)其對(duì)MuRF1表達(dá)的抑制效果。<

2、br>　　結(jié)果：1.實(shí)時(shí)定量PCR顯示四組干擾質(zhì)粒MuRF1Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ對(duì)基因MuRF1的mRNA的抑制率在轉(zhuǎn)染后48h分別為67﹪、31﹪、11﹪，20﹪,不同干擾序列的抑制效果有差異(F=4.527，P=0.024)；72h分別為79﹪、59﹪、50﹪和61﹪，不同干擾序列的抑制效果有差異(F=19.088，P<0.001),與48h相比，抑制效應(yīng)更為明顯，但以siRNAMuRF1-Ⅰ的抑制效果最為明顯（t=8.201,P<0.0

3、01）。2.使用Western印跡灰度分析顯示四組干擾序列對(duì)基因MuRF1的蛋白的抑制率在轉(zhuǎn)染后48h分別為61﹪、40﹪、9﹪，15﹪，不同干擾序列的抑制效果有差異(F=4.286，P=0.028);72h分別為70﹪、54﹪、30﹪，46﹪，不同干擾序列的抑制效果有差異(F=3.731，P=0.042);與48h相比，MuRFl-Ⅰ、MuRFl-Ⅱ抑制效應(yīng)與對(duì)照組相比有顯著性差異（tⅠ=3.256,P=0.009;t=2.512,P

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論