MRKH綜合征的病因分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、MRKH綜合征（Mayer-Rokitansky-Küster-Hausersyndrome）指先天性的子宮及陰道上2/3段缺失，也就是人們常說(shuō)的“石女”。從古代起，不少戲劇作品和筆記小說(shuō)中就有對(duì)“石女”的記載和描繪，可見(jiàn)普通大眾和科學(xué)家們一樣，都對(duì)此懷有極為強(qiáng)烈的好奇心。但幾百年來(lái)“石女”的產(chǎn)生原因一直是一個(gè)懸而未決的科學(xué)之謎。從目前的研究結(jié)果看，大部分“石女”實(shí)際上是罹患了一種由未知的遺傳缺陷引起，以先天性始基子宮、無(wú)陰道為主要表現(xiàn)

2、的遺傳病。因此找到導(dǎo)致“石女”發(fā)病的遺傳學(xué)基礎(chǔ)，將有助于科學(xué)解釋這一歷史悠久的自然之謎。然而由于本病為罕見(jiàn)病，加之患者不能生育，具有良好研究?jī)r(jià)值的家系十分罕見(jiàn)，給病因研究帶來(lái)困難。在傳統(tǒng)的微衛(wèi)星全基因組連鎖分析難以奏效的情況下，以往的研究者先是試圖采用定位候選克隆的策略，檢驗(yàn)了胚胎發(fā)育、器官形成、性別分化過(guò)程中的一系列關(guān)鍵基因，均未能發(fā)現(xiàn)有意義的突變;繼而基于全基因組掃描芯片技術(shù)，報(bào)道少數(shù)患者的染色體存在某些微重復(fù)區(qū)域，但不能確定與本病

3、的發(fā)病相關(guān)。時(shí)至今日，MRKH綜合征在遺傳方式確證、致病基因定位、不完全外顯率和多樣化表現(xiàn)度背后的原因揭示等一系列問(wèn)題上，都還沒(méi)有得到滿意的解答。
　　我們?cè)谂R床中發(fā)現(xiàn)一個(gè)世代連續(xù)發(fā)病的MRKH綜合征家系，現(xiàn)存活患者3名。①結(jié)合系譜分析、臨床表現(xiàn)，確定其可能的遺傳模式。②利用覆蓋全基因組的arrayCGH微陣列比較基因組雜交芯片，對(duì)先證者檢測(cè)染色體結(jié)構(gòu)變異，并針對(duì)其X染色體MOSPD1基因附近的可疑重復(fù)變異區(qū)設(shè)計(jì)2對(duì)實(shí)時(shí)定量PCR

4、引物，擴(kuò)增相應(yīng)片段，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證分析。③接著我們選取家系中連續(xù)兩代發(fā)病，且親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的2位患者進(jìn)行全外顯子組測(cè)序，對(duì)2位患者的共有變異應(yīng)用Sanger測(cè)序法進(jìn)行家系內(nèi)共分離驗(yàn)證。主要結(jié)果:①本家系的遺傳方式為典型的常染色體顯性遺傳，合并外顯不完全。②家系患者不存在DNA拷貝數(shù)變異。③共找到5個(gè)可能的致病突變，均為雜合性單堿基替換突變，均為家系內(nèi)3例患者及各自母親所共有;其中，B淋巴細(xì)胞9類似物編碼基因BCL9L第2711

5、位的C突變?yōu)門（相應(yīng)的第904位密碼子由S變?yōu)長(zhǎng)）、載脂蛋白B編碼基因APOB第9412位的C突變?yōu)镚（相應(yīng)的第3138位密碼子由P變?yōu)锳）、ATP依賴的RNA解旋酶編碼基因DQX1第290位的A突變?yōu)镚（相應(yīng)的第97位密碼子由Q變?yōu)镽）致病的可能性相對(duì)較大，肌球蛋白(Ⅶ)編碼基因MYO7B第4862位的C突變?yōu)門（相應(yīng)的第1621位密碼子由A變?yōu)閂）、犬尿氨酸酶編碼基因KYNU3'末端非編碼區(qū)A→G單堿基改變致病的可能性較小。結(jié)論:本