五靈脂化學(xué)成分與質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、五靈脂(Faeces Trogopterori)為復(fù)齒鼯鼠(Trogopterus xanthipes Milne-Edwards)的干燥糞便，性味甘溫，無毒，入肝經(jīng)，具有疏通血脈，散瘀止痛的功效。主治血滯、經(jīng)閉、腹痛、胸脅刺痛、跌撲腫痛和蛇蟲咬傷等癥。臨床上五靈脂廣泛應(yīng)用于婦科疾病、心腦血管疾病和消化系統(tǒng)疾病等。此外，五靈脂還用于藥酒和香精的制造。近年，五靈脂的年需求量已達(dá)700～800噸。但是，由于五靈脂為動(dòng)物糞便，相關(guān)研究工作遠(yuǎn)落

2、后于其它中藥，而且現(xiàn)代研究多集中在藥理活性上，有關(guān)其化學(xué)成分和質(zhì)量控制的研究少之又少。因此，本論文對(duì)五靈脂的化學(xué)成分和質(zhì)量控制進(jìn)行了較為深入的研究，研究結(jié)果將對(duì)五靈脂藥材的深度開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 對(duì)五靈脂藥材的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究，采用溶劑法提取藥材，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到三部分浸膏。采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)五靈脂石油醚部分化學(xué)成分進(jìn)行了分離鑒定，用面積歸一化法確定了各成分的相對(duì)含量，共鑒定了21個(gè)化

3、合物，其中主要成分為正四十一烷醇(21.72％)、香紫蘇醇(14.08％)和棕櫚酸(9.11％)，醇類化合物占總量的40％以上。采用柱色譜分離純化，四大光譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，從乙酸乙酯部分共分離鑒定了4個(gè)化合物，分別為二氫谷甾醇、β-谷甾醇、原兒茶酸和胡蘿卜苷。
　　 原兒茶酸被證明為五靈脂藥材中的活性成分之一，因此本研究以原兒茶酸為對(duì)照品，建立了五靈脂藥材的HPLC含量測(cè)定方法。HPLC測(cè)定五靈脂中原兒茶酸含量的色譜條件：Agil

4、ent1200，Hypersil GOLD C18色譜柱；流動(dòng)相為甲醇-1％冰醋酸水(5∶95)；流速為1 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)260 nm。利用該方法，測(cè)定了12批市售五靈脂藥材中原兒茶酸的含量，含量范圍介于十萬分之二至萬分之六之間。
　　 五靈脂的乙酸乙酯部位在相關(guān)藥理藥效實(shí)驗(yàn)中，具有明顯的活血化瘀的功效。因此對(duì)五靈脂乙酸乙酯部位的化學(xué)成分進(jìn)行了HPLC分析，建立了指紋圖譜分析方法：Agilent1200，Hypers

5、il GOLD C18色譜柱；流動(dòng)相為A：甲醇，B：1％冰醋酸水。梯度洗脫程序：0～15 min(A：5％～30％)；15～40 min(A：30％～50％)；40～80 min(A：50％～75％)；80～90 min(A：75％～100％)；90～100min(A100％)；流速為1 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)260 nm。對(duì)14批不同來源的五靈脂藥材的乙酸乙酯部位的指紋圖譜進(jìn)行了分析，共選出13個(gè)共有峰，其中12批藥材的相似度大于

6、0.9，只有兩批樣品的相似度較低，由此推測(cè)這兩批樣品的質(zhì)量略差些，因此可以考慮通過指紋圖譜的分析比較藥材的優(yōu)劣。
　　 通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)五靈脂揮發(fā)油和側(cè)柏葉揮發(fā)油的主要成分進(jìn)行了對(duì)比鑒定，并用面積歸一化法確定了各成分的相對(duì)含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：兩種揮發(fā)油中均含有下列9個(gè)化合物，分別是3-蒈烯、α-石竹烯、β-石竹烯、大香葉烯-D、α-蛇麻烯、反-雪松醇、雪松醇、α-杜松醇、Podocarp-7-en-3β-ol；但這9個(gè)化