人參皂苷酶代謝產(chǎn)物化學(xué)修飾及其抗癌活性研究.pdf

1、該試驗(yàn)采用有機(jī)溶劑提取、萃取、大孔吸附樹(shù)脂層析、硅膠柱層析等方法,從人參中分離得到了人參皂苷Re、Rb<,1>,對(duì)它們進(jìn)行了物理、化學(xué)及波譜分析,確定了結(jié)構(gòu).在大孔樹(shù)脂D101、NKA-12的比較研究中發(fā)現(xiàn),NKA-12對(duì)人參皂苷有較好的吸附分離效果,經(jīng)乙醇梯度洗脫可以直接分離得到人參皂苷Re.采用酶N37040對(duì)人參單體皂苷Rb<,1>、Re酶代謝機(jī)理進(jìn)行了研究,明確了Rb<,1>的代謝途徑為Ginsenoside-Rb<,1>→Gi

2、nsenoside-Rd→Ginsenoside-F<,2>→Metabolite-M1→20(S)-protopanaxadiol.對(duì)Re的酶解產(chǎn)物進(jìn)行了分析,確定了其代謝途徑為Ginsenoside-Re→Ginsenoside-Rg<,1>→Ginsenoside-Rh<,1>→20(S)-Protopanaxa-triol.采用Agilent1100高效液相色譜儀對(duì)酶解總皂苷樣品中M1、Rg<,3>含量進(jìn)行了測(cè)定,確定M1最佳酶

3、的轉(zhuǎn)化率為8.36﹪;Rg<,3>最佳酶的轉(zhuǎn)化率為2.58﹪.采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)系統(tǒng)研究了不同酶、溫度、時(shí)間對(duì)Metabolite M1、Ginsenoside-Rg<,3>轉(zhuǎn)化率的影響.采用Schotten-Baumann方法,將獲得代謝物M1與脂肪酸進(jìn)行化學(xué)合成,將合成產(chǎn)物萃取、離心、濃縮,經(jīng)硅膠柱層析分離、高校液相純化,得兩種主要單體化合物.經(jīng)物理、化學(xué)、光譜、波譜分析,確定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu).采用移植腫瘤動(dòng)物模型對(duì)小鼠腹腔注射SM1