感染性壞死性胰腺炎大鼠模型建立及其機制的初步探討.pdf

1、目的：急性胰腺炎繼發(fā)感染是臨床上急性胰腺炎高死亡率的主要原因，然而感染發(fā)生機制尚未完全闡明。本實驗首先探索采用?；悄懰徕c混合大腸桿菌建立感染性壞死性胰腺炎大鼠模型的可行性；其次通過檢測血液中AMY、CRP、TNF-α和IL-1變化，觀察胰腺病理學改變，探討感染性壞死性胰腺炎相對特殊的病理生理發(fā)生機制，為后續(xù)研究提供初步的實驗室依據(jù)。 方法：第一部分30只健康雄性SD大鼠隨機分成三組，每組10只：①C1組：即時配制大腸桿菌和?；悄?/p>

2、酸鈉的混合液，濃度分別為103個/ml和5％，按0.1ml/100g將上述混合液經膽胰管逆行注射，速度為0.2ml/min；②C2組：大腸桿菌濃度為104個/ml，余同①組；③C3組：大腸桿菌濃度為105個/ml，余同①組。觀察8小時，記錄各組存活率：存活者抽血測定血清淀粉酶和血液細菌培養(yǎng)，并取胰腺組織行病理學檢查和細菌培養(yǎng)。 第二部分32只健康雄性SD大鼠隨機分成四組，每組8只：①假手術組(A組)，剖腹后僅翻動胰腺，不做其他操

3、作；②壞死性胰腺炎組(B組)：經膽胰管逆行注射5％?；悄懰徕c，量按0.1ml/100g，注射速度為0.2ml/分；③感染性壞死性胰腺炎組(C組)；經胰管逆行注射入大腸桿菌濃度為104個/ml和牛磺膽酸鈉濃度為5％的混合液，余同②組；④單純大腸桿菌逆行注射組(D組)：經膽胰管逆行注射濃度為104個/ml的單純大腸桿菌液，余同②組。觀察8小時，存活者抽血測定血清淀粉酶、C反應蛋白(CRP)、TNF-α和IL-1以及血液的細菌培養(yǎng)；同時觀察胰

4、腺組織的大體形態(tài)，并取胰腺組織進行光鏡、電鏡的病理學檢查和細菌培養(yǎng)(定性)。 結果：第一部分①8小時存活率：C1組和C2組大鼠在8小時內無死亡，C3組大鼠在8小時內死亡3只。②胰腺組織細菌培養(yǎng)陽性率：C1組為60％，C2組和C3組均為100％。③血液細菌培養(yǎng)陽性率：C1組、C2組和C3組分別為20％、30％和57.2％。④隨著不同組別細菌濃度的逐步升高，8小時血清淀粉酶測定結果也有逐步上升的趨勢，但相互之間的差異無統(tǒng)計學意義(P

5、＞0.05)。⑤光鏡下觀察：三個實驗組病變嚴重，均有出血、壞死的改變，濃度較高者病變相對較重。 第二部分①胰腺組織細菌培養(yǎng)陽性率：A組、B組、C組和D組分別為0、12.5％、100％、0。②血液細菌培養(yǎng)陽性率：A組、B組、C組和D組分別為0、12.5％、50％、0。③血清淀粉酶測定結果：與A組比較，B組、C組和D組的血清淀粉酶濃度均顯著升高(P＜0.01)；C組的血清淀粉酶濃度較B組、D組顯著上升(P＜0.01)。④血清CRP測

6、定結果：與A組比較三個實驗組CRP濃度均顯著增加(P＜0.01)；C組CRP濃度顯著高于B、D組組(P＜0.01)。⑤血清α-TNF測定結果：與A組比較三個實驗組血清α-TNF均有升高，只有C組的α-TNF濃度的增加有顯著的統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；A組、D組、B組比較，三組血清α-TNF有上升趨勢，但相互之間無統(tǒng)計學差異，(P＞0.05)。⑥血清IL-1的測定結果:與A組比較三個實驗組血清IL-1濃度均顯著增加(P＜0.01)。C組

7、血清IL-1濃度較B組、D組顯著升高(P＜0.01)，B組相對D組血清IL-1濃度相對較高，但無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。⑦胰腺組織病理學檢查結果(光鏡)：A組胰腺正常，D組偶見腺細胞水腫。B組、C組見出血、壞死表現(xiàn)：C組病變以壞死為主，B組以出血現(xiàn)象為主。⑧胰腺組織電鏡下典型病理變化。A組與D組腺泡細胞內結構均正常。B組腺泡細胞內，分泌顆粒增多，粗面內質網(wǎng)輕度擴張。C組見分泌顆粒明顯增多，粗面內質網(wǎng)擴張明顯。 結論：①大腸桿