NF kappa B在肺腺癌群集耐藥作用機制的研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文NFkappaB在肺腺癌群集耐藥作用機制的研究姓名：何建明申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導教師：梁后杰20030501第三軍醫(yī)大學碩士研究生論文electrophoreticmobilityshiftassay(EMSA)檢測了NFkappaB的活性。結(jié)果顯示，MCS各組的NFkappaB活性都明顯高于MCC相應組。結(jié)合藥敏結(jié)果，提示，NFkappaB在群集耐藥中起重要作用。結(jié)果還顯示，在MCC和MCS，加入藥

2、物處理后，NFkappaB的活性均明顯升高，且以MCS為甚；在加入NFkappaB抑制劑后再加藥物處理，與僅加藥物處理相比，NFkappaB的活性均明顯降低。提示腫瘤細胞在受到化療藥物刺激后，上調(diào)NFkappaB的活性j減低藥物敏感性；阻斷NFkappaB信號轉(zhuǎn)導通路，可增強腫瘤細胞藥物敏感性。最后，檢測了凋亡、BclxL、Bcl一2和Bax，以進一步研究NFkappaB在群集耐藥中的作用機制。發(fā)現(xiàn)，阻斷NFkappaB后再用藥物處理，

3、與僅用藥物處理相比，凋亡率明顯升高，BclxL、Bcl2表達量均降低。結(jié)合阻斷NFkappaB后藥敏升高的結(jié)果，證明，阻斷NFkappaB上調(diào)BClxL、Bcl2抗凋亡的作用，可增強腫瘤細胞藥物敏感性。結(jié)果還顯示，MCS各組BclxL、Bel2表達量都明顯高于相應的MCC組。而MCS的NFkappaB活性高于MCC，且具有群集耐藥性。說明NFkappaB上調(diào)BelxL、Bcl2抗凋亡是群集耐藥重要原因。而在用化療藥物處理后，在MCC與M

4、CS均可見Bcl—xL、Bcl一2表達量明顯升高。結(jié)合前面結(jié)果，說明：化療藥物作用于細胞后，NFkappaB活性增強，上調(diào)BclxL、Bel2的表達抗凋亡，降低瘤細胞的藥物敏感性，介導群集耐藥。本實驗還發(fā)現(xiàn)，阻斷NFkappaB后再用藥物處理與僅用化療藥物處理相比，Bcl2表達量僅輕微下降。其原因可能與Bcl2受到多種因素(如鈣粘附素、自介素)調(diào)控有關(guān)。而Bax，未加干擾因素時，在MCS組與MCC組，其表達量相近；經(jīng)化療藥物處理后，表達

5、量升高。由于細胞凋亡與否與抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白的比例和結(jié)合方式相關(guān)。提示MCS的耐藥性升高的重要原因是，NFkappaB上調(diào)BclxL、Bcl一2的表達，影響抗凋亡蛋白與促凋亡蛋白的比例和／或結(jié)合方式，抑制凋亡，導致腫瘤細胞耐藥。通過以上的討論，我們得出以下結(jié)論：MCS作為一個由多層細胞構(gòu)成的整體，能很好地模擬體內(nèi)實體瘤，具有群集耐藥性。其群集耐藥的重要原因是NFkappaB活性升高。NFkappaB發(fā)揮作用的結(jié)構(gòu)基礎可能是細胞間粘附