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文檔簡介
1、腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導配體(TNFrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)是TNF家族成員中的一員,TRAIL分子能夠特異性地誘導多種組織來源的腫瘤細胞凋亡,而不影響正常組織和細胞的功能,因而具有較好的臨床應用前景?! 肨RAIL進行腫瘤的基因治療可以說是一個很有潛力的途徑。因為體外實驗發(fā)現(xiàn),攜帶TRAIL基因的腺病毒轉(zhuǎn)染的腫瘤細胞不但可以誘導其自身的凋亡,還可以通過旁路效應誘導未轉(zhuǎn)染的腫瘤細
2、胞的死亡。 一些實驗提示內(nèi)皮祖細胞(EndothelialProgenitorCell,EPC)在體內(nèi)能定向歸巢于腫瘤,參與腫瘤新生血管的建立。利用這一點,將EPC偶聯(lián)抑制血管發(fā)生因子或其它抗腫瘤藥物或轉(zhuǎn)染抑癌基因可抑制腫瘤的生長,可能是治療腫瘤的有效方法?! ”疚姆忠韵聨讉€步驟進行研究:1.LTRAIL對卵巢癌細胞的促凋亡作用。分析重組人TRAIL蛋白誘導卵巢癌細胞3AO的凋亡作用。2.臍血EPC的分離、培養(yǎng)及鑒定。研究臍血中E
3、PC的分離方法、培養(yǎng)擴增條件及鑒定其表面標志。3.GFP-hTRAIL融合基因表達載體的構(gòu)建。構(gòu)建GFP-hTRAIL融合基因表達載體,測定其在卵巢癌細胞中的表達。4.TRAIL質(zhì)粒電穿孔及脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染EPC后分泌TRAIL蛋白的檢測及轉(zhuǎn)染效率的比較。研究電穿孔及脂質(zhì)體兩種轉(zhuǎn)染方法對EPC轉(zhuǎn)染TRAIL質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率。5.轉(zhuǎn)染TRAIL質(zhì)粒后EPC培養(yǎng)上清對3A0卵巢癌細胞的體外殺傷作用。研究轉(zhuǎn)染TRAIL質(zhì)粒后EPC培養(yǎng)上清對3AO卵巢
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