青貯飼料中產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌的篩選、發(fā)酵和產(chǎn)酶條件優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究分離篩選了一株產(chǎn)纖維素酶的芽抱桿菌ws-6,優(yōu)化了該菌株的產(chǎn)酶發(fā)酵條件,初步研究了酶學(xué)性質(zhì),并進(jìn)一步優(yōu)化了菌株的發(fā)酵條件,結(jié)果分述如下： ⑴菌株分離篩選及鑒定從烏蘇窖藏飼料中分離篩選出6個產(chǎn)CMCase的菌株,以代號ws-6的菌株產(chǎn)酶水平最高,通過形態(tài)學(xué)、生理生化指標(biāo)及16S rDNA序列比對,鑒定為地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)。菌株最適生長pH值為5.0～7.0,最適生長溫度35℃,產(chǎn)CM

2、Case活力達(dá)2.55U/mL。 ⑵菌株產(chǎn)酶條件及酶學(xué)性質(zhì)經(jīng)碳、氮源及微量元素的篩選實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)分析,最適合菌株ws-6產(chǎn)CMCase的發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(g/L)：葡萄糖15g、CMC-Na5g、酵母膏15g、KH2PO40.5g、NaCl 5g。發(fā)酵產(chǎn)酶的最適初始pH值為6.5,最適培養(yǎng)溫度為35℃,最適裝液量30mL(250mL三角瓶)。對菌株ws-6的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行初步研究表明：酶反應(yīng)的最適pH值為5.0,最適溫度為50℃

3、,最適底物濃度為0.6％,最適反應(yīng)時間為20min。 ⑶菌株發(fā)酵條件優(yōu)化經(jīng)碳、氮源及微量元素的篩選實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)分析,確定ws-6菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳組分為(g/L)：蔗糖60g、蛋白胨30g、NaCl 30g、K2HPO42g MgSO41g、PESO40.02g、MnSO40.01g。對發(fā)酵條件進(jìn)行了研究,發(fā)酵的最適初始pH值為5.5,最適培養(yǎng)溫度為35℃,最適裝液量為10mL(250mL三角瓶),通過優(yōu)化培養(yǎng)基組分和培養(yǎng)條

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