具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球的制備及靶向治療骨感染的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、由于近年開(kāi)放性外傷、高能量外傷急驟增加,傷情復(fù)雜,除骨折外多合并軟組織損傷。處理不及時(shí)或內(nèi)固定技術(shù)失誤常引發(fā)骨感染。并且其的發(fā)生率呈逐年上升的趨勢(shì)。對(duì)于骨感染的治療,早期應(yīng)用大劑量的敏感抗生素是一切治療的基礎(chǔ)。局部應(yīng)用抗生素較全身應(yīng)用抗生素,有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)：(1)可以準(zhǔn)確地將抗生素投放到骨感染的部位；(2)可以在局部迅速達(dá)到峰值藥物濃度并可維持較長(zhǎng)時(shí)間,在局部形成幾十甚至幾百倍于全身應(yīng)用抗生素時(shí)的藥物濃度；(3)可以降低抗生素的毒副作用

2、,雖然局部藥物濃度極高,但用藥總量遠(yuǎn)低于全身用藥量,因而不會(huì)對(duì)全身重要臟器產(chǎn)生毒副作用；(4)可以避免局部缺血對(duì)抗生素作用的影響,并逐漸的被臨床工作者接受。并成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的研究熱點(diǎn)?，F(xiàn)有局部應(yīng)用抗生素的方法都存在著各種各樣的缺點(diǎn)。靶向給藥系統(tǒng)是指藥物在載體作用下,通過(guò)局部給藥或全身給藥,主動(dòng)或被動(dòng)濃集、定位于靶器官、靶細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)特定結(jié)構(gòu)。最近,基于納米技術(shù)發(fā)展起來(lái)的納米載體介導(dǎo)的磁性載藥系統(tǒng),在外加磁場(chǎng)作用下,能實(shí)現(xiàn)位點(diǎn)特異的靶向給藥

3、目的,有利于提高病灶部位的局部藥物濃度,同時(shí)使非治療部位的藥物濃度降低,從而進(jìn)一步提高療效,減少毒副作用。尤其是磁性靶向藥物載體的研究,近年來(lái)受到了越來(lái)越多的關(guān)注,采用高分子材料將其與藥物包裹起來(lái)形成磁性微球,通過(guò)靜脈注射或口服進(jìn)入體內(nèi),在外加磁場(chǎng)作用下,使其移向病變部位,達(dá)到定向治療的目的。磁性給藥載體的特點(diǎn)是在外加磁場(chǎng)作用下,能實(shí)現(xiàn)位點(diǎn)特異的靶向給藥目的,有利于提高病灶部位的局部藥物濃度,同時(shí)使非治療部位的藥物濃度降低,從而進(jìn)一步提

4、高療效,減少毒副作用。該磁性納米載藥系統(tǒng)具有體外可控的特點(diǎn),為骨感染的靶向治療提供了一個(gè)新的方向。 目的： 一.制備具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球,并對(duì)其理化特性進(jìn)行評(píng)價(jià)。 二.觀測(cè)具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球在體外對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌作用。 三.制備出金黃色葡萄球菌感染的大鼠骨感染動(dòng)物模型。 四.研究具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球?qū)Υ笫蠊歉腥镜闹委熜Ч岸靖弊饔谩?方法： 一.以殼

5、聚糖作為萬(wàn)古霉素的載體,用乳化交聯(lián)法制備具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球,通過(guò)掃描電鏡及透射電鏡觀察微球形態(tài),振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)確證納米微粒磁響應(yīng)性的存在,并對(duì)納米微球的平均粒徑、載藥量、包封率等進(jìn)行評(píng)價(jià)。 二.將具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球與金黃色葡萄球菌共育,觀察體外抗菌效果。 三.在大鼠脛骨內(nèi)直接注射金黃色葡萄球菌,制備出大鼠急性骨感染動(dòng)物模型。 四.將具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球應(yīng)用于大鼠急性骨感染動(dòng)物模型中,觀

6、察外加磁場(chǎng)下具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球注射后對(duì)大鼠骨感染的影響、大鼠脛骨X線及病理的改變。 結(jié)果： 一.成功制備具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球,其外觀呈規(guī)則球形,平均粒徑298nm,平均載藥量為32.36％,平均包封率為80.9％,體外具有較好的磁場(chǎng)順應(yīng)性。 二.具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球與金黃色葡萄球菌共育48小時(shí)后表明,納米微球在體外可抑制金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)；而不含萬(wàn)古霉素的磁性微球與金黃色葡萄球菌共育48小

7、時(shí)后,未見(jiàn)其能抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)。結(jié)果表明具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球在體外有較好的抗菌活性。 三.在大鼠脛骨平臺(tái)下鉆孔后,注射不同濃度的金黃色葡萄球菌一周后,發(fā)現(xiàn)當(dāng)接種的金黃色葡萄球菌的濃度達(dá)到6.0×104CFU時(shí),就出現(xiàn)了明顯的骨質(zhì)紅腫、骨皮質(zhì)增寬、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及出現(xiàn)死骨等骨感染典型改變。 四.具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球應(yīng)用于大鼠骨感染動(dòng)物模型中。外部磁場(chǎng)介導(dǎo)下,具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球尾靜脈注射后可聚

8、集在病灶區(qū),明顯抑制骨感染。其萬(wàn)古霉素的實(shí)際使用劑量?jī)H為全身應(yīng)用萬(wàn)古霉素劑量的1/3。與全身應(yīng)用萬(wàn)古霉素組相比較,發(fā)現(xiàn)無(wú)顯著性差異,甚至個(gè)別參數(shù)還稍優(yōu)于全身應(yīng)用萬(wàn)古霉素的療效。 結(jié)論： 一.成功制備可用于體內(nèi)的具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球,其在體外具有較好的磁響應(yīng)性。 二.具有磁場(chǎng)順應(yīng)性的萬(wàn)古霉素微球有抗菌活性,在體外可抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)。 三.當(dāng)接種的金黃色葡萄球菌的濃度達(dá)到6.0×104CFU/