流動(dòng)注射-化學(xué)發(fā)光法在藥物、食品以及DNA雜交分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、化學(xué)發(fā)光(CL)是指在沒有任何光、電、熱的作用下，只是吸收化學(xué)反應(yīng)放出的化學(xué)能而激發(fā)，產(chǎn)生光的輻射的發(fā)光現(xiàn)象?；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)光路簡(jiǎn)單，無需外加光源，不存在熒光分析中瑞利散射和拉曼散射以及溶劑熒光雜質(zhì)產(chǎn)生的背景信號(hào)，具有較高的信噪比，可獲得與激光誘導(dǎo)熒光相媲美的靈敏度?；瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)多是快速的動(dòng)力學(xué)反應(yīng)，較易受環(huán)境因素的影響，因此反應(yīng)過程難于控制，重現(xiàn)性和選擇性較差，使其在定量分析中受到一定限制。 流動(dòng)注射分析技術(shù)(FIA)是一種

2、在非平衡狀態(tài)下，溶液自動(dòng)處理及分析技術(shù)，將FIA與CL聯(lián)用，在很大程度上克服了化學(xué)發(fā)光分析重現(xiàn)性差．操作費(fèi)時(shí)、不便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等缺點(diǎn)，從而使化學(xué)發(fā)光作為一種靈敏高效的痕量分析方法在分析化學(xué)領(lǐng)域得到了迅速發(fā)展。 納米粒子因其獨(dú)特的化學(xué)和物理性質(zhì)，為生物醫(yī)學(xué)研究提供了新的研究途徑，同時(shí)也推動(dòng)了化學(xué)和生物傳感器的應(yīng)用。納米粒子獨(dú)特性質(zhì)與生物分子雜交反應(yīng)的特異性和流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光的高靈敏性、重現(xiàn)性相結(jié)合，使其應(yīng)用范圍更廣泛。 本

3、論文基于化學(xué)發(fā)光的高靈敏度檢測(cè)特性結(jié)合流動(dòng)注射技術(shù)研究化學(xué)發(fā)光在藥物、食品有益成分的測(cè)定以及結(jié)合納米粒子分離、標(biāo)記探索了化學(xué)發(fā)光在傳感器方面的應(yīng)用。論文主要研究?jī)?nèi)容如下： 第一章：緒論簡(jiǎn)單介紹了化學(xué)發(fā)光的原理、幾種常用的反應(yīng)體系、化學(xué)發(fā)光在蛋白質(zhì)、DNA片斷分析、食品分析以及藥物分析中的應(yīng)用，最后介紹了化學(xué)發(fā)光法與流動(dòng)注射技術(shù)、高效分離技術(shù)以及微全分析技術(shù)的聯(lián)用及其應(yīng)用，最后闡述了本論文的目的和意義。 第二章：流動(dòng)注射一

4、化學(xué)發(fā)光法選擇性測(cè)定復(fù)方滴鼻液中的磺胺嘧啶本文基于在酸性條件下磺胺嘧啶、KMnO<,4>、HCHO的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)建立了一種簡(jiǎn)單靈敏的流動(dòng)注射．化學(xué)發(fā)光分析方法選擇性測(cè)定了復(fù)方滴鼻液中磺胺嘧啶。在所選擇的最佳實(shí)驗(yàn)條件下，磺胺嘧啶的濃度與化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度在8.0×10<'-7>到2.0x10<'-4> mol/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，按照IUPAC組織的規(guī)定，以空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍，計(jì)算方法的檢測(cè)限為：2.0x10<'-7>mol/L(3σ)。對(duì)

5、5.0x10<'-5>mol/L的磺胺嘧啶標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定11次，計(jì)算測(cè)量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.53％。共存的鹽酸麻黃堿等不干擾測(cè)定，因此本方法成功地用于處方藥復(fù)方滴鼻液中磺胺嘧啶的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。第三章：基于固相萃取的流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光測(cè)定紅酒中的白藜蘆醇本文基于酸性條件下KMnO<,4>、HCHO和白藜蘆醇之間的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)建立了一種靈敏的測(cè)定紅酒中的白藜蘆醇的流動(dòng)注射．化學(xué)發(fā)光法。紅酒在分析前用C<,18>固相萃取小柱處理。在優(yōu)化

6、條件下，相對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與白藜蘆醇的濃度在1.32×10<'-8>到1.32x10<'-5>mol/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。根據(jù)IUPAC規(guī)定，以空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算方法的檢測(cè)限為3.30x10<'-9>mol/L，平行測(cè)定11次得到的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.8％。將該法成功地應(yīng)用于紅酒中自藜蘆醇的含量測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)加入回收試驗(yàn)，結(jié)果令人滿意。并對(duì)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)機(jī)理做了簡(jiǎn)單探討。 第四章：基于磁性納米粒子的流動(dòng)注射

7、化學(xué)發(fā)光DNA傳感器． 本文擬建立了一種用于DNA雜交檢測(cè)的光學(xué)傳感器。該方法涉及到納米磁性粒子用于單鏈DNA的固定、納米CuS顆粒用于DNA標(biāo)記以及快速靈敏的流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光用于定量檢測(cè)。磁性納米粒子是一種新型的固相載體，具有易于制備，表面改性等優(yōu)點(diǎn)。在EDAC存在下，靶寡聚核苷酸通過5’端的氨基共價(jià)結(jié)合到羧基化的磁性納米粒子表面。固定在磁性納米粒子表面的目標(biāo)DNA與溶液中硫化銅納米粒子標(biāo)記的寡聚核苷酸探針雜交后，然后將含有d