慢性氟中毒大鼠骨組織SPARC、MMP-9基因表達的意義研究.pdf

1、目的：觀察慢性氟中毒大鼠骨組織的形態(tài)學(xué)改變和檢測骨組織中 SPARC和MMP-9 mRNA及其蛋白的表達變化，為氟中毒骨骼損傷的早期預(yù)防和控制提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：36只SD大鼠按體重、性別隨機分3組，每組12只，組內(nèi)雌雄各半。對照組(飲水含氟量＜1mg／L)、低氟組(飲水加氟量5mg／L)、高氟組(飲水加氟量50mg／L)。飼養(yǎng)大鼠8個月，觀察氟斑牙發(fā)生情況及測定尿氟含量，明確氟中毒模型建立成功后股動脈放血處死大鼠，氟離子電

2、極法測各組大鼠尿氟、骨氟含量；收集血清，用酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay，ELISA）檢測大鼠血清中骨堿性磷酸酶（Bone Alkaline Phosphatase,BALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate-Resistant Acid Phosphataseform5b，TRACP5b）的含量；蘇木素-伊紅(HematoxylinandEosin，HE)染色后光鏡下觀察股骨下段

3、骨組織形態(tài)學(xué)改變并進行骨組織形態(tài)計量學(xué)測量；免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry，IHC）和原位雜交技術(shù)(In-situ hybridization,ISH)分別檢測骨組織中的SPARC和MMP-9的蛋白及其mRNA表達水平。
　　結(jié)果：1、慢性氟中毒大鼠模型復(fù)制成功，表現(xiàn)為染氟組大鼠出現(xiàn)不同程度氟斑牙損害，高氟組最為嚴重，對照組未出現(xiàn)氟斑牙，各組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，實驗組尿氟、

4、骨氟含量隨氟濃度的增加而逐漸升高，各組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　2、染氟組大鼠血清BALP含量均增高，各組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；血清TRACP5b含量在染氟組均增加，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　3、染氟組大鼠骨組織呈骨皮質(zhì)增厚、骨小梁增寬、骨髓腔間隙變窄等骨質(zhì)硬化表現(xiàn)。與對照組比較，染氟組大鼠的骨皮質(zhì)厚度、骨小梁寬度、骨髓腔間隙及骨小梁密度差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（

5、P<0.05），隨氟濃度增加，差異更明顯。
　　4、與對照組比較，染氟組大鼠骨組織成骨細胞中SPARC mRNA及其蛋白表達水平逐漸增高，各組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；
　　5、與對照組比較，染氟組大鼠骨組織破骨細胞中MMP-9 mRNA及其蛋白表達水平隨氟濃度的增加而升高，各組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：1.慢性飲水型氟中毒大鼠模型復(fù)制成功，染氟組大鼠出現(xiàn)骨代謝紊亂，成骨活躍和