甲醛與苯系物對人胚肺KMB-17細(xì)胞的聯(lián)合毒作用及其作用機(jī)制.pdf

1、目的：體外觀察甲醛與苯系物對人胚肺二倍體細(xì)胞(KMB—17)的細(xì)胞毒性，探討甲醛及苯系物對人胚肺二倍體細(xì)胞的聯(lián)合毒性及聯(lián)合毒作用類型，并探討其毒作用機(jī)制，為制定甲醛、苯系物的室內(nèi)環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：1．甲醛及苯系物對人胚肺二倍體細(xì)胞(KMB—17)聯(lián)合毒性研究：以不同濃度毒物及其混合物對人胚肺二倍體細(xì)胞染毒，采用MTT法測各濃度組人胚肺二倍體細(xì)胞存活率，根據(jù)線性回歸法求出各毒物及其混合物半數(shù)致死濃度(OLC50)，

2、以Finney法求出各毒物及其混合物預(yù)計半數(shù)致死濃度(PLC50)，根據(jù)預(yù)計半數(shù)致死濃度與實(shí)際半數(shù)致死濃度的比值Q判斷各毒物聯(lián)合毒作用類型。2．甲醛及苯系物對人胚肺二倍體細(xì)胞的損傷及其機(jī)制研究：分溶劑對照組和甲醛及苯系物混合物損傷組(終濃度為0.1mmol/L，0.2mmol/L，0.3mmol/L，0.4mmol/L)加藥后培養(yǎng)24h，分光光度法檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中SOD活力，MDA、以及細(xì)胞內(nèi)GSH含量的變化。并應(yīng)用SP試劑盒檢測細(xì)胞核

3、轉(zhuǎn)錄因子NBkB蛋白表達(dá)水平的變化；以0.3mmol/L甲醛及苯系物混合物組為研究對象，培養(yǎng)0h、6h、12h、24h、48h，檢測上述各項(xiàng)指標(biāo)，分析甲醛及苯系物混合物損傷人胚肺二倍體細(xì)胞的時間—效應(yīng)關(guān)系。 結(jié)果：1．四種化合物對人胚肺二倍體細(xì)胞的LC50分別為：甲醛：0.234x10—3mmol/ml，苯：0.079mmol/ml，甲苯：0.215mmol/ml，二甲苯：0.209mmol/ml。甲醛與苯系物混合染毒Q值在0.

4、5到2.6之間，苯與甲苯、二甲苯混合染毒Q值小于0.5，甲苯、二甲苯混合染毒Q值大于2.6；2．甲醛及苯系物混合染毒可呈劑量依賴性和時間依賴性的致人胚肺二倍體細(xì)胞MDA增加，SOD活力減弱，GSH減少，與對照相比，其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)；3．甲醛及苯系物組NF—kB的活力高于對照組，其改變具有劑量依賴性和時間依賴性。 結(jié)論：1．四種化合物毒性大小順序是甲醛＞苯＞二甲苯＞甲苯，與整體動物毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本一致：甲醛與苯