黃芪制劑對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)增殖及其相關(guān)調(diào)控分子表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：惡性腫瘤目前已成為危害人類生命健康最重要的疾病之一，每年約100萬(wàn)人因患癌癥而死亡，對(duì)其發(fā)病機(jī)理及治療的研究已取得一定的成績(jī)，綜合治療原則已越來(lái)越受關(guān)注，尤其是我國(guó)傳統(tǒng)中藥制劑用于治療和輔助治療腫瘤的研究已成為新熱點(diǎn)。以往的研究多是針對(duì)中藥抑制腫瘤生長(zhǎng)方面，而對(duì)某些中藥促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖作用的研究報(bào)道較少。我們?cè)陬A(yù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，已作為益氣類傳統(tǒng)中藥應(yīng)用于臨床，以及作為扶正祛邪類抗瘤中藥制劑應(yīng)用于輔助治療腫瘤的黃芪制劑（AMB）可促

2、進(jìn)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，提示黃芪及其提取物作為傳統(tǒng)中藥，能否應(yīng)用于宮頸癌患者及具此類腫瘤誘發(fā)體質(zhì)人群的其他疾病的治療尚存在爭(zhēng)議。本課題旨在通過(guò)實(shí)驗(yàn)探討AMB對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)增殖及其相關(guān)調(diào)控分子表達(dá)的影響，為指導(dǎo)臨床合理選用及慎用此種抗瘤中藥制劑奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和提供理論依據(jù)。
　　 方法：確定最適宜的腫瘤細(xì)胞接種濃度及培養(yǎng)時(shí)間后，選用不同濃度的AMB作用于Hela細(xì)胞，以不經(jīng)AMB作用的相應(yīng)同步培養(yǎng)的Hela細(xì)胞作對(duì)照。MTT

3、法測(cè)定AMB作用后對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)增殖變化的A492值。采用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞周期及增殖凋亡狀況，并計(jì)算出凋亡指數(shù)（AI）和增殖指數(shù)（PI）。培養(yǎng)細(xì)胞以HE染色進(jìn)行常規(guī)病理觀察；采用免疫細(xì)胞化學(xué)法測(cè)定Hela細(xì)胞中 PCNA、Bax、Bcl-2等增殖凋亡相關(guān)分子表達(dá)的變化，分別以矩形走行計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，計(jì)算表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞百分率表示陽(yáng)性表達(dá)范圍；并以圖像分析系統(tǒng)所示陽(yáng)性酶點(diǎn)（PED）表示陽(yáng)性染色范圍大小，以灰度值（GS）表示陽(yáng)性染色

4、強(qiáng)度（取值范圍為0～255，其數(shù)值越大表示陽(yáng)性染色越弱，數(shù)值越小表示陽(yáng)性染色越強(qiáng)）。
　　 結(jié)論：
　　 1.AMB在一定濃度范圍內(nèi)可抑制Hela細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)其生長(zhǎng)增殖。
　　 2 AMB在一定濃度范圍內(nèi)可使Hela細(xì)胞出現(xiàn)S期阻滯，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖。
　　 3.AMB在一定濃度范圍內(nèi)可使Hela細(xì)胞中Bcl-2、PCNA表達(dá)增強(qiáng)，Bax表達(dá)降低。
　　 4.AMB在臨床抗腫瘤及其他疾病治療