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1、目的: 通過體外模擬熱CO2氣腹模型,研究熱CO2氣腹(42℃、43℃)對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901及MFC的殺傷、增殖抑制以及抑制侵襲和遷移作用,從而進(jìn)一步探討其作為一種新的抑制腹腔種植轉(zhuǎn)移方法應(yīng)用于腹腔鏡胃癌手術(shù)中的可行性。
方法:建立體外熱CO2氣腹實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,通過熱CO2氣腹對(duì)胃癌細(xì)胞(SGC-7901、MFC)的作用,系統(tǒng)深入地探討不同作用溫度和作用時(shí)間(42℃、43℃,1-3小時(shí))的熱CO2氣腹的殺傷、增殖抑制以及抑制
2、侵襲和遷移作用,并明確其作用機(jī)制。MTT法檢測(cè)細(xì)胞殺傷及增殖抑制作用;流式細(xì)胞術(shù)測(cè)細(xì)胞凋亡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)以明確細(xì)胞死亡機(jī)制;Transwell法及劃痕實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞侵襲與遷移能力。
結(jié)果: MTT法檢測(cè)表明熱CO2氣腹能顯著抑制胃癌SGC-7901、MFC細(xì)胞增殖,42℃作用3h時(shí)增殖抑制率即有(23.42±3.57)%(P<0.05),43℃作用3h后,細(xì)胞增殖抑制率高達(dá)(30.15±4.22)%;流式細(xì)胞術(shù)測(cè)細(xì)胞凋亡
3、和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)分析表明,細(xì)胞凋亡是熱CO2氣腹作用后細(xì)胞死亡的主要方式。熱CO2氣腹誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡呈劑量依賴性,凋亡比例隨作用溫度和時(shí)間的增加而不斷增加,43℃作用3h后的凋亡檢測(cè)表明細(xì)胞凋亡率達(dá)29.88±1.35%(P<0.05);形態(tài)學(xué)觀察(透射電鏡)顯示典型的細(xì)胞凋亡改變。Transwell實(shí)驗(yàn)及劃痕實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞侵襲與遷移能力結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,熱CO2氣腹對(duì)胃癌細(xì)胞的侵襲和遷移有明顯的抑制作用,并呈明顯的時(shí)間依賴性。
4、在接受熱CO2氣腹(42℃、43℃)處理后,侵襲和遷移過Matrigel-包被的PVDF膜的胃癌細(xì)胞數(shù)目明顯少于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論: 熱CO2氣腹對(duì)胃癌細(xì)胞有顯著的殺傷作用、抑制增殖、抑制侵襲和遷移作用。本研究表明熱CO2氣腹具有應(yīng)用于胃癌腹腔種植轉(zhuǎn)移處理的潛質(zhì),有必要通過體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討熱CO2氣腹對(duì)胃癌腹腔種植轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制,從而有望為臨床上腹腔鏡胃癌手術(shù)中胃癌細(xì)胞腹腔種植轉(zhuǎn)移的防治提供一種新的思
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