不同品種產(chǎn)地枳實有效成分的對比分析.pdf

1、枳實始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,為蕓香科植物酸橙Citrus qurantium L.及其栽培變種或甜橙Citrus sinensis Osbeck的干燥幼果。具有破氣消積,化痰散痞的功效。主要有效成分為黃酮類、揮發(fā)油類及生物堿類成分。研究表明,不同批次枳實中黃酮類成分存在種類差異,究竟是什么因為引起這種差異還不清楚。不同結(jié)構(gòu)的黃酮類成分生物活性不同。那么,同為枳實中主要有效成分的生物堿和揮發(fā)油成分是否也有差異?本文探討從飲片性狀鑒定品種的可

2、行性,基于枳實品種產(chǎn)地的多樣,從主要黃酮類成分的種類及含量、辛弗林的含量、揮發(fā)油成分的種類及含量、IR吸收特征,分析有效成分種類及含量與品種產(chǎn)地的關(guān)系。
　　 系統(tǒng)研究了近50年來國內(nèi)外枳實的研究概況,并在此基礎(chǔ)上進行了以下實驗研究:
　　 探討從飲片性狀鑒定品種的可行性?！吨袊幍洹?005版枳實項下性狀描述為半球形,少數(shù)為球形,直徑0.5～2.5 cm。外果皮黑綠色或暗棕綠色,切面中果皮略隆起,厚0.3～1.2 cm

3、,黃白色或黃褐色,邊緣有1～2列油室,瓤囊棕褐色。依據(jù)文獻研究結(jié)果,從枳實主產(chǎn)地四川、湖南、江西、貴州采集了30個批次枳實藥材,進行品種鑒定。將藥材自中部橫切為兩半,低溫干燥,測量瓤囊直徑和橫斷面直徑；計算瓤囊面積占橫切面面積的百分比。結(jié)果顯示,來源于酸橙及其變種臭橙C.aurantium‘Xiucheng’和枳橙C.aurantium×P.trifoliata枳實的瓤囊面積占橫切面面積的百分比范圍為0.57％～15.0％；香橙枳實的范

4、圍為13.2％～19.9％；甜橙枳實的范圍為20.1％～44.2％；來自江西和重慶枸橘的范圍為25.4％～70.6％,而來自福建枸橘的范圍與甜橙相似。表明以飲片瓤囊面積占橫切面面積百分比為指標,有助于對枳實飲片進行鑒定。
　　 采用RRLC法分析不同品種產(chǎn)地枳實中主要黃酮類成分的種類和含量,確定枳實中黃酮類成分的種類和含量是否與品種和產(chǎn)地有關(guān)。
　　 黃酮類成分與品種相關(guān)性研究結(jié)果顯示,來源于酸橙及其栽培變種臭橙、枳橙和

5、香橙枳實的主要黃酮類成分為橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和柚皮蕓香苷,且酸橙及其栽培變種臭橙、枳橙柚皮苷和新橙皮苷含量高于柚皮蕓香苷和橙皮苷,而香橙則正好相反:來源于甜橙枳實的主要黃酮類成分為橙皮苷和柚皮蕓香苷,不含有柚皮苷和新橙皮苷。
　　 黃酮類成分與產(chǎn)地相關(guān)性研究結(jié)果表明,不同產(chǎn)地同一品種枳實中黃酮類成分種類和各成分含量范圍無區(qū)別,同一產(chǎn)地不同品種枳實中黃酮類成分種類不同。
　　 目前研究結(jié)果表明,枳實中黃酮類成分種類和

6、含量的差異與品種有關(guān),與產(chǎn)地?zé)o關(guān)。
　　 測定不同品種產(chǎn)地枳實中生物堿辛弗林的含量,探討不同品種產(chǎn)地枳實中辛弗林含量是否存在差異。結(jié)果顯示,辛弗林的含量差異與品種和產(chǎn)地沒有明顯相關(guān)性。
　　 針對目前枳實品種分類存在的問題,即香橙是否為酸橙的變種問題,采用RRLC法測定了不同品種產(chǎn)地枳實的指紋圖譜,借助中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件和系統(tǒng)聚類軟件,為枳實品種分類提供依據(jù)。27個樣品的指紋圖譜分為三類,酸橙及其栽培變種臭橙

7、和枳橙為一類,香橙為一類,甜橙為一類；同品種各批次樣品間相似度很高,均高于0.9；而酸橙與香橙間、酸橙與甜橙間的相似度均低于0.2；香橙與甜橙間的相似度范圍為0.701～0.783。在系統(tǒng)聚類圖中,酸橙、甜橙和香橙各聚為一類。此結(jié)果與《中國植物志》分類一致,支持了香橙不屬于酸橙栽培變種的結(jié)論。由于香橙在主產(chǎn)地江西產(chǎn)量很大,建議中國藥典單獨將香橙作為枳實的品種來源。
　　 采用RRLC—MS分析枳實中存在的其它黃酮類成分,研究不同

8、品種枳實中是否存在其它成分的差異。采用電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)[(±)ESI—MSn]分析主要化學(xué)成分的裂解特征,獲得了反映結(jié)構(gòu)特征及其差異的質(zhì)譜裂解規(guī)律。參考多篇國內(nèi)外相關(guān)色譜分析文獻,綜合考慮色譜條件、保留時間、出峰順序、紫外光譜等數(shù)據(jù),對酸橙、香橙和甜橙三個品種枳實的指紋圖譜進行色譜峰歸屬。辨認了已知的四種黃酮類成分柚皮蕓香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷。此外,從酸橙中發(fā)現(xiàn)了一個獨有的化學(xué)成分,還找到一個酸橙和香橙中含有而甜橙中不包含的成

9、分,它們的具體結(jié)構(gòu)還需進一步確認:從甜橙中新辨認了兩個化合物,為忍冬苷和3ˊ,4ˊ,5,7-四羥基黃酮-7—O-蕓香糖,其中忍冬苷為甜橙中獨有的化學(xué)成分:從香橙中新辨認了3ˊ,4ˊ,5,7-四羥基黃酮-7-O-蕓香糖。
　　 采用GC-MS分析揮發(fā)油中的化學(xué)成分,探討化學(xué)成分的種類及含量是否與品種產(chǎn)地有關(guān)。對分析所得成分的質(zhì)譜數(shù)據(jù)經(jīng)數(shù)據(jù)庫檢索并與有關(guān)標準圖譜資料核對定性,運用化學(xué)模式識別技術(shù)對GC—MS總離子流圖進行分析。聚類結(jié)

10、果顯示,所有甜橙枳實聚為一類,酸橙及其栽培變種臭橙和枳橙與香橙枳實聚為一類,香橙的三個樣品聚集為小類,表明枳實揮發(fā)油中的成分與品種有關(guān)。此外,同一品種相同產(chǎn)地的差異小于同一品種不同產(chǎn)地。表明枳實揮發(fā)油中成分除與品種有關(guān),還受到產(chǎn)地的影響。
　　 探討采用IR進行品種鑒定的可行性。對黃酮類成分種類存在差異的十個批次枳實進行紅外光譜的測定,采用紅外光譜儀軟件對樣品譜圖進行相關(guān)性研究。結(jié)果顯示,甜橙三個批次枳實的紅外光譜譜圖與枳實對照