益智組分中藥改善衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用與機(jī)制研究.pdf

1、目的:對(duì)益智組分中藥(YZCCM)改善衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用和機(jī)制進(jìn)行研究。
　　方法:(1)①建立HPLC法測(cè)定組方中阿魏酸、天麻素的含量;建立比色法測(cè)定人參皂苷的含量。②采用大孔吸附樹脂法分別從黃芪和淫羊藿藥材中分離純化得到黃芪皂苷和淫羊藿黃酮;以黃芪甲苷為對(duì)照品，選用香草醛—冰醋酸發(fā)色體系，采用可見分光光度法對(duì)黃芪皂苷進(jìn)行含量測(cè)定;選用淫羊藿苷作為對(duì)照品，采用比色法對(duì)淫羊藿黃酮進(jìn)行含量測(cè)定。(2)皮下注射D-半乳糖以建立

2、擬衰老小鼠模型，并進(jìn)行最優(yōu)配伍的YZCCM的藥效學(xué)評(píng)價(jià):①通過Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，以定向?qū)Ш胶涂臻g探索能力為指標(biāo)考察其對(duì)衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。②利用試劑盒分別測(cè)定AChE（乙酰膽堿酯酶）、ChAT（乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶），Glu（谷氨酸）的含量，以考察其對(duì)衰老小鼠神經(jīng)遞質(zhì)的影響。③采用試劑盒法分別測(cè)定SOD（超氧化物歧化酶）、MDA(丙二醛)、GSH-px(谷胱甘肽過氧化物酶)的含量以評(píng)價(jià)其對(duì)氧化應(yīng)激的影響。④采用免疫組化方法分別檢

3、測(cè)小鼠海馬和大腦皮質(zhì)組織中Aβ1-40含量及細(xì)胞凋亡水平。
　　結(jié)果:(1)①組方中阿魏酸、天麻素、人參皂苷的含量分別為98.00％、97.19％、80.68％。②提取分離得到的黃芪皂苷、淫羊藿黃酮的含量分別為80.67％、83.47％。(2)①YZCCM組小鼠定向航行成績(jī)和空間探索成績(jī)縮短，學(xué)習(xí)記憶能力明顯提高，與模型組相比有顯著性差異(P＜0.05)。②YZCCM組小鼠腦組織中AChE活性明顯降低，ChAT活力明顯提高，Glu

4、表達(dá)顯著減少，與模型組相比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。③YZCCM組小鼠MDA含量降低，SOD和GSH-px活力提高與模型組相比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。④YZCCM組小鼠海馬和皮質(zhì)中Aβ1-40含量降低，平均灰度值升高，陽性細(xì)胞表達(dá)數(shù)減少，細(xì)胞凋亡程度減弱，與模型組相比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。
　　結(jié)論:YZCCM能有效地對(duì)抗D-半乳糖所致的小鼠多項(xiàng)衰老指標(biāo)的出現(xiàn)，改善衰老小