應(yīng)激QTL座位22個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記以及MOR基因多態(tài)與豬運(yùn)輸應(yīng)激反應(yīng)性狀關(guān)系的研究.pdf

1、本研究旨在分離鑒定豬運(yùn)輸應(yīng)激相關(guān)的遺傳標(biāo)記或功能基因.選用兩種不同品種的豬，二花臉豬和皮特蘭豬，及其雜交后代為動(dòng)物模型，對(duì)仔豬進(jìn)行翻背測(cè)試，及對(duì)肥豬進(jìn)行長(zhǎng)途運(yùn)輸應(yīng)激.首先探討應(yīng)激QTL的22個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記與F2代(皮x二)豬運(yùn)輸應(yīng)激反應(yīng)性狀(神經(jīng)內(nèi)分泌和肉質(zhì))和翻背評(píng)分之間的相關(guān)：然后檢測(cè)了純種二花臉豬和皮特蘭豬的mu-阿片受體基因(MOR)的多態(tài)性和MOR在垂體的mRNA水平，分析MOR基因的單核苷酸多態(tài)與應(yīng)激性狀(包括翻背評(píng)分、運(yùn)輸?shù)?/p>

2、血漿皮質(zhì)醇水平)的相關(guān)性.研究結(jié)果如下： 1.應(yīng)激QTL的22個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記與豬的翻背評(píng)分和運(yùn)輸應(yīng)激性狀的相關(guān)性分析 在以純種的皮特蘭豬和二花臉豬為親本建立的F2資源群體中選取52頭豬，對(duì)仔豬進(jìn)行出生后第3、10和17d的翻背測(cè)試實(shí)驗(yàn)(翻背評(píng)分分別記為BS3、BS10、BS17).測(cè)定運(yùn)輸后的血漿應(yīng)激和代謝相關(guān)激素水平：Insulin、ACTH、Cortisol、T3和T4；運(yùn)輸結(jié)束后宰殺，測(cè)定6項(xiàng)肉質(zhì)指標(biāo)：pH45min

3、、pH24h，嫩度，系水力、蒸煮損失和肉色評(píng)分(1*，a*，b*)；以上指標(biāo)作為運(yùn)輸應(yīng)激性狀.在已知的應(yīng)激性狀QTL座位區(qū)域內(nèi)選擇22個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記，對(duì)各微衛(wèi)星標(biāo)記的多態(tài)與翻背評(píng)分扣運(yùn)輸應(yīng)激性狀進(jìn)行了相關(guān)性分析.結(jié)果表明： 各位點(diǎn)等位基因數(shù)為3—8個(gè)，雜合度為0.4155-0.7432，多態(tài)信息含量為0.3651～0.8150。 方差分析顯示：SW2446對(duì)BS3影響達(dá)到顯著水平(P<0.05)；SW2446(P<0.01

4、)、SW1816( P<0.05)和SW0092( P<0.05)對(duì)BS10有顯著影響；SW2108，SW1816和SW1023對(duì)BS17有顯著影響(P<0.05)；SW1808(P<0.01)和SW0320(P<0.05)對(duì)ACTH有顯著影響；SW1303對(duì)Insulin，SW1092對(duì)Cortisol，SW0320對(duì)T3，SO101對(duì)T4有顯著影響；S0101對(duì)肉色a*有極顯著影響(P<0.01)；SW1023對(duì)系水力有顯著影響(

5、P<0.05)；SW1808對(duì)系水力有極顯著影響(P<0.01)，對(duì)肉色1*、a*有顯著影響(P<0.05)；S0112和S0092對(duì)pH45min有顯著影響(P<0.05)。這些微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)運(yùn)輸應(yīng)激性狀存在顯著影響。 2.MOR的多態(tài)性與豬的翻背測(cè)試和運(yùn)輸應(yīng)激血漿皮質(zhì)醇(Cortisol)水平的相關(guān)性分析 用PCR-SSCP方法對(duì)12頭純種皮特蘭豬和25頭純種二花臉豬MOR基因進(jìn)行多態(tài)性分析，以GAPDH基-因?yàn)閮?nèi)標(biāo)，

6、用real time PCR法對(duì)MOR基-因的在垂體中的表達(dá)進(jìn)行了相對(duì)定量分析，在仔豬出生后第3、10和17d進(jìn)行翻背測(cè)試實(shí)驗(yàn)，并于140-150日齡時(shí)對(duì)6頭皮特蘭豬和9頭二花臉豬進(jìn)行2h運(yùn)輸應(yīng)激實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)運(yùn)輸過(guò)程的-15(基礎(chǔ)水平)、0、15、30、60、120、和135min，共7個(gè)時(shí)間點(diǎn)的血漿Cortisol水平.分析MOR各基因型之間在垂體mRNA表達(dá)水平、“Backtest Score”和血漿Cortisol水平的差異。