膠質(zhì)細胞多巴胺反應基因克隆及其特征分析.pdf

1、第三軍醫(yī)大學博士學位論文膠質(zhì)細胞多巴胺反應基因克隆及其特征分析姓名：石軍申請學位級別：博士專業(yè)：組織學與胚胎學指導教師：蔡文琴2001.5.1鄧紋狀體，藏干來源懿培養(yǎng)星形蔽質(zhì)維胞cAMP積漿。進一步疵用窀生理穢放射性配體結(jié)合奏顯影研究提示膠質(zhì)維飚凝有DA受體。我們應爝【3H】DA放慰性受體分析法(radieceptorbindingassay，RRA)研究發(fā)現(xiàn)三令不同部位來溪熬凝形膠鼴綱鼴具有5個不弱的解離常數(shù)，表明膠質(zhì)細胞分奪廣泛囂晝

2、獒有部位異矮特性。運贛靜研究穰耀分子生物學技術如PCR秘原健雜交，歪實培養(yǎng)紋狀體黢質(zhì)緇飚表達D幫D2受俸。舅矯，跤矮纓魔具有類熬神經(jīng)元垂冬DA攝取系統(tǒng)。由范可覓，膠溪縮脆怒腦肉DA乍瘸黲重要耗纓鼴，并雖膠震纓脆可鏈在DA神經(jīng)系統(tǒng)疾病中菇有；i常霪要數(shù)俸用。吉零礤究零l蹋纓腿與分子生物學翡多耱技術方法，克隧與鏊定系列膠矮纓腿DA的耱關基因，薺對部分薪基爨功能遴行初步熊特往分毒廳。一方瑟，從理論上毒到予分援DA裕翅予星形膠質(zhì)緇胞的分子梳箭，

3、了勰膠震綱腿在DA神經(jīng)系統(tǒng)孛鯰生理功能；另一方覆，可能獲得DA系統(tǒng)疾痣熬攘關基因，對揭示糖金森氏瘸，精神分裂癥幫藥秘敲癮等痰病的痣毅，提巍蝰湊診叛以及治療水平有夔要蠡冬黢瑙價德。本硬突首先鐵大鬣弦綴織分離蹬養(yǎng)星形液矮綱魏，爨多融胺DA處理后提取mRaNA，然螽結(jié)合寢感李露鍘游減雜交(Supressionsubtractivehybridization，SSH)秘選擇性差異；；|；迭(PCRSelectDifierentialScreen

4、ing)方法，分離獲褥27個DA調(diào)節(jié)表達eDNA殼隆。經(jīng)Northern雜交驗證，序列測定與生物信怠學分櫥，齷確了14個DA調(diào)節(jié)表達靜基因，包括神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運擺關懿多功能調(diào)節(jié)蛋翻泛索蛋自連接酶Nedd4，滿節(jié)細胞分泌活動戇癌袋鼴鈣聯(lián)結(jié)蛋叁，能璧鋱謝褶關豹蘩萄糖調(diào)節(jié)蛋自，DA代謝稻關酶NAD(P)H醌逐原酶幫NADH泛醞氧耽還黎酶，戩及鐵蛋自H亞單位等。實驗結(jié)采提暴(I)DA激活了膠溪縮魏肉復雜的信號傳遞通貉，并羹涉及生長囂子傣號途徑、辮體