miR-34c在快速老化小鼠海馬組織中的表達及其靶基因的初步鑒定.pdf

1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權及知識產權歸屬承諾本學位論文在導師(或指導小組)的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產權歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內容相關的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產權均歸河北醫(yī)科大學所有。否則研究生簽名哥。影導師簽移加院領廠知f。河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進

2、行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內容外，文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生答轢／子美彩)C、導師簽章汐矽么痧／，7伽磚礴7鼉中文摘要miR34c在快速老化鼠海馬組織中的表達及其靶基因的初步鑒定摘要目的：阿爾茨海默癥(Alzheimer’SDisease，AD)’是中樞神經系統(tǒng)最常見的一種神經系統(tǒng)退行性疾病，主要表現(xiàn)為漸進性記憶障礙、認知功能障

3、礙、人格改變及語言障礙等神經精神癥狀，嚴重影響社會交往、就業(yè)與生活質量，給個人、家庭和社會帶來沉重負擔。AD的病因和發(fā)病機制十分復雜，至今尚不完全清楚。目前存在多種學說，如氧化應激學說、Ap級聯(lián)學說、Tau蛋白假說、線粒體功能障礙學說、基因突變學說和自噬功能失調學說等。miRNAs是體內重要的一種內源性非編碼d、RNA，通過與mRNA3UTR結合發(fā)揮轉錄后調節(jié)作用，在人體大約有2030％的基因是受miRNA調控的。近年來，研究表明，mi

4、R18b、miR325、miR615等多個miRNAs在AD的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮的重要調節(jié)作用。盡管如此，失調的miRNAs在AD發(fā)生發(fā)展中的作用機制尚不完全明確，是當前本領域研究的熱點問題。本研究通過對快速老化小鼠(SenescenceAcceleratedMouse—Prone／8，SAMP8)海馬組織中miRNAs的表達譜進行分析，結合生物信息學、RealtimePCR和Westernblot等方法，篩選并確定目標miRNAs及

5、其靶基因，進一步采用熒光素酶實驗觀察miR34c對其靶基因突觸結合蛋白(Synaptotagmin1，sytl)的負向調控作用。為闡明miR一34c在AD發(fā)生發(fā)展過程中的作用以及開發(fā)以miRNAs為靶點的藥物提供了新的思路。方法：①法實驗動物：封閉群清潔級快速老化亞系SAMP8及抗快速老化亞系SAMRl(SenescenceacceleratedMouseResistant／1，SAMRl)。②②SaMRn表達譜的檢測：采用miRNA基

6、因芯片技術檢測S腳8和正常同齡對照SAMRl鼠海馬組織中miRNA表達譜的改變情況。⑧③利用生物信息學方法進行KEGG分析，預測差異性表達的miRNAs可能參與的信號通路。④能差異性表達miRNA的驗證：通過RealtimePCR驗證目標miRNAmiR34c在3月齡SAMP8矛n同齡對照SAMRl小鼠海馬組織中的表達；進一步通過Real—timePCR坳J]miR34c在3月齡SAMRld、鼠腦、心、肝、腎等組織的表達和3，6矛t]9