呼和浩特地區(qū)布魯氏菌bp26和OMP10基因的克隆及PCR檢測方法的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、根據(jù)Genbank發(fā)表的布魯氏菌bp26基因和OMP10基因分別設(shè)計合成一對特異性引物，提取11株實驗室分離的呼和浩特地區(qū)布魯氏菌和兩株參考布魯氏菌的總DNA為模板，通過聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)擴增得到bp26和OMP10基因，回收純化后將這兩個基因分別連接到PMD18-T載體上，熱激發(fā)轉(zhuǎn)化受體菌大腸桿菌DH5a，藍白斑篩選陽性克隆，提取質(zhì)粒后進行序列測定。測序結(jié)果顯示，bp26基因全長為995bp，包含一個由753bp組成的完整開

2、放閱讀框架，編碼250個氨基酸。11株分離菌株的同源性為100％，與疫苗株M5、S2的同源性分別為100％和99.9％，與參考菌株S19、870的同源性分別為99.9％和100％。OMP10基因全長531bp，包含一個由381bp組成的完整開放閱讀框架，編碼126個氨基酸。11株分離菌株的同源性為100％，與疫苗株M5、S2的同源性均為100％，與參考菌株544的同源性為99.7％。 為了彌補血清學(xué)和微生物學(xué)方法檢測和診斷布魯氏

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