Notch配體在哮喘發(fā)病機(jī)制中作用的研究.pdf

1、背景：哮喘是由多種炎癥細(xì)胞參與的氣道慢性炎癥性疾病，也是一種多基因遺傳的復(fù)雜性狀疾病，其特點(diǎn)為氣道可逆性阻塞和氣道高反應(yīng)性。在哮喘的發(fā)病過(guò)程中以T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的對(duì)致敏原的免疫反應(yīng)是哮喘發(fā)病的關(guān)鍵性始動(dòng)環(huán)節(jié)。研究證實(shí)，哮喘患者體內(nèi)存在Th1/Th2亞群的功能失衡：Th1型細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)較正常人低，而Th2型的免疫應(yīng)答水平則顯著上調(diào)。 目的：明確Notch配體（Delta1、Jagged1、Jagged2）在小鼠哮喘模型肺中的表達(dá)

2、水平，探討其在哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用。使用反義寡核苷酸干預(yù)Jagged1基因的表達(dá)，了解Jagged1反義寡核苷酸對(duì)哮喘小鼠肺細(xì)胞Jagged1表達(dá)及細(xì)胞因子（IL-4、IFN-γ）分泌的作用。 方法：通過(guò)卵清蛋白腹腔注射及霧化吸入建立BALB/c小鼠哮喘模型，采用半定量PCR檢測(cè)Notch配體（Delta1、Jagged1、Jagged2）的mRNA表達(dá)水平在哮喘組和正常對(duì)照組小鼠肺組織及肺細(xì)胞中是否存在差異。使用脂質(zhì)體將Jag

3、ged1反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染入哮喘小鼠肺細(xì)胞，用半定量PCR檢測(cè)Jagged1反義寡核苷酸對(duì)哮喘小鼠肺細(xì)胞Jagged1 mRNA表達(dá)的作用，及采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)肺細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IFN-γ的分泌。 結(jié)果：半定量RT-PCR分析顯示哮喘小鼠肺組織及肺細(xì)胞的Delta1 mRNA表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組（P<0.001）；哮喘小鼠肺組織的Jagged1 mRNA表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組（P<0.001），肺細(xì)胞

4、的Jagged1 mRNA表達(dá)高于正常對(duì)照組（P<0.05），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；哮喘小鼠肺組織及肺細(xì)胞的Jagged2 mRNA表達(dá)高于正常對(duì)照組（P<0.05），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同濃度的Jagged1反義寡核苷酸對(duì)哮喘小鼠肺細(xì)胞的Jagged1 mRNA表達(dá)具有不同的抑制作用，且反義寡核苷酸干預(yù)后肺細(xì)胞的IL-4分泌減少，IFN-γ分泌增加。 結(jié)論：Delta1配體可能主要調(diào)節(jié)哮喘Th1反應(yīng)，Jagged1、Jag