誘導(dǎo)血紅素氧合酶-1表達(dá)及雷帕霉素抑制PDGF誘導(dǎo)的大鼠平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的試驗(yàn)研究.pdf

1、血管移植術(shù)、血管成形術(shù)后再狹窄、高血壓病和動(dòng)脈粥樣硬化形成的一個(gè)共同病理過程是血管內(nèi)膜增生，這種增生以血管中膜VSMCs向內(nèi)膜浸潤和增殖為主要特征。在VSMCs增殖之前，有一個(gè)明顯的表型改變的過程。PDGF是VSMCs分化和增殖的有絲分裂原，能夠抑制收縮蛋白SM-α-actin的表達(dá)，同時(shí)啟動(dòng)VSMCs的DNA合成，促進(jìn)VSMCs由分化表型向收縮表型轉(zhuǎn)化。而HO-1是熱休克蛋白家族成員，是體內(nèi)重要的內(nèi)源性保護(hù)蛋白之一，可以明顯抑制平滑肌

2、細(xì)胞增殖。雷帕霉素可以對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和分化有抑制作用，并且可以明顯抑制VSMCs的增殖。已被廣泛應(yīng)用于藥物洗脫支架以預(yù)防血管成型術(shù)后再狹窄。為了觀察HO-1和雷帕霉素對(duì)PDGF誘導(dǎo)的大鼠VSMCs表型轉(zhuǎn)變的影響和對(duì)比HO-1與雷帕霉素作用結(jié)果的差別，設(shè)計(jì)了本試驗(yàn)研究。 目的：觀察HO-1與雷帕霉素對(duì)PDGF誘導(dǎo)的大鼠VSMCs表型轉(zhuǎn)化的作用。 方法：原代大鼠VSMCs分離培養(yǎng)，給予PDGF-BB誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)化。

3、同時(shí)給予不同劑量的血紅素氧合酶誘導(dǎo)劑氯血紅素誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)，和雷帕霉素共培養(yǎng)24小時(shí)。免疫熒光染色后應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡觀察各組SM-α-actin和PCNA的表達(dá)，計(jì)算各組熒光強(qiáng)度，觀察在不同處理?xiàng)l件下對(duì)VSMCs表型轉(zhuǎn)化的影響。 結(jié)果：PDGF-BB20nmol/mL作用原代VSMCs 24h后，SM-a-actin與PCNA免疫熒光染色與對(duì)照組相比較發(fā)現(xiàn)SM-a-actin表達(dá)減弱，PCNA表達(dá)增強(qiáng)。氯血紅素誘導(dǎo)HO-

4、1后可以抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs表型改變，并且隨劑量的增加，抑制強(qiáng)度增加。較低劑量的雷帕霉素可以抑制PDGF誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)化。 結(jié)論： 1、PDGF-BB亞型可以促進(jìn)原代培養(yǎng)的大鼠VSMCs由收縮表型向合成表型的轉(zhuǎn)化。 2、大鼠VSMCs可能在體內(nèi)即存在部分合成表型，并且在體外培養(yǎng)的過程中有自發(fā)性去分化改變。 3、給予氯血紅素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)可以對(duì)抗PDGF-BB誘導(dǎo)的大鼠VSMCs表型