毛細(xì)管電泳在線富集技術(shù)在款冬花有效成分分析中的應(yīng)用.pdf

1、高效毛細(xì)管電泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresisHPCE)是20世紀(jì)80年代初發(fā)展起來的一種新型分離分析技術(shù)。與高效液相色譜技術(shù)相比，毛細(xì)管電泳(CapillaryElectrophoresisCE)具有分離效率高、靈敏度高、速度快、所需樣品少、成本低等特點(diǎn)。CE的理論和應(yīng)用研究是分析化學(xué)最活躍的領(lǐng)域之一。然而，由于CE進(jìn)樣體積很小以及在柱檢測的光程較短，通用型紫外檢測器雖然能達(dá)到較低的質(zhì)量

2、檢測限，但濃度檢測限仍比較高，這使得CE在分離測定實(shí)際樣品中的痕量組分時受到很大的限制。迄今為止，如何提高CE的檢測靈敏度仍然是分析工作者關(guān)注的主要問題之一。
　　 目的：采用毛細(xì)管大體積樣品堆積法建立測定款冬花中的蘆丁，綠原酸的方法；聯(lián)用反向陰離子選擇性耗盡進(jìn)樣和膠束掃集兩種在線富集技術(shù)，建立反向膠束毛細(xì)管電泳法測定款冬花中槲皮素的方法；采用反向毛細(xì)管電泳法測定遠(yuǎn)志中的細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷元。
　　 方法：毛細(xì)管大體積樣品堆積

3、法電泳條件：以40mmol/LNaH2PO4-40mmol/LBorax-30％methanol(pH9.0)為緩沖體系，運(yùn)行電壓為20kv(+)—(-)，壓力進(jìn)樣5psi×4s，進(jìn)水時間40s，測量波長364nm；陰離子膠束掃集毛細(xì)管電泳法電泳條件：50mmol/LNaH2PO4-25mmol/LH3BO3(pH=2)-20％甲醇-20％SDS為緩沖體系，分離電壓20kv，進(jìn)樣電壓20kv，進(jìn)樣時間30s，進(jìn)水時間40s，測量波長36

4、4nm;反向毛細(xì)管電泳法電泳條件：50mmol/L硼砂-35％甲醇為緩沖體系，測量波長214nm。
　　 結(jié)果：在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，用大體積樣品堆積法測定款冬花中蘆丁，金絲桃苷，綠原酸的含量，線性范圍分別為20～400μg/mL，16.5～330μg/mL，25～500μg/mL，平均回收率分別為100.3％、100.O％和100.5％;陰離子膠束掃集毛細(xì)管電動色譜法測定款冬花中槲皮素的含量，槲皮素和鄰峰能達(dá)到良好分離，在10～

5、160μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為109.7％。反向毛細(xì)管電泳法測定遠(yuǎn)志中細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷元的含量，分別在56.3～900μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為102.4％。
　　 結(jié)論：本文采用毛細(xì)管電泳大體積樣品電堆積富集方法對款冬花中三種化合物進(jìn)行了分析，實(shí)現(xiàn)了大體積進(jìn)樣；采用反向陰離子耗盡進(jìn)樣-膠束掃集毛細(xì)管電動色譜法在線富集技術(shù)，建立了反向膠束毛細(xì)管電泳方法測定款冬花中槲皮素的方法；為該藥材的質(zhì)量研究