基于VERO細(xì)胞變形的化學(xué)污染物生物毒性檢測(cè)及其敏感性驗(yàn)證.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，人們對(duì)飲用水自身的健康安全、對(duì)飲用水承載載體的健康可靠性的關(guān)注也越來(lái)越多。同時(shí)，近年來(lái)飲用水中化學(xué)污染物逐漸增多，對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境造成的危害日益加重。因此，對(duì)飲用水及相關(guān)材料的安全評(píng)價(jià)具有重要意義。但目前為止，國(guó)內(nèi)尚無(wú)較為靈敏、可靠的飲用水及相關(guān)材料綜合生物毒性的評(píng)價(jià)方法。Vero細(xì)胞與人體高度同源，對(duì)各類化學(xué)物質(zhì)的響應(yīng)具有一定的普適性，并且培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單。本文研究了典型有機(jī)污染三氯苯酚(TCP)對(duì)Vero細(xì)胞

2、形態(tài)的影響和對(duì)細(xì)胞增殖的抑制，同時(shí)研究了其對(duì)發(fā)光細(xì)菌發(fā)光效率的抑制，通過(guò)比較這三種生物毒性表現(xiàn)方法的靈敏度，分析了Vero細(xì)胞變形法在化學(xué)物質(zhì)生物毒性檢測(cè)中的可靠性，并嘗試用Vero細(xì)胞狀態(tài)的變化來(lái)評(píng)價(jià)自來(lái)水出水各階段的水樣及飲用水相關(guān)材料生物安全性，驗(yàn)證該方法在實(shí)際運(yùn)用中的可行性。通過(guò)對(duì)幾種材料以及飲用水水質(zhì)評(píng)價(jià)方法的摸索和總結(jié)以期能為建立一套靈敏、可靠的飲用水及相關(guān)材料安全評(píng)價(jià)方法提供參考價(jià)值。 研究結(jié)果表明：1)Vero細(xì)

3、胞對(duì)濃度為0.5mg·L-1的三氯苯酚TCP就能作出響應(yīng)，隨TCP濃度增加，變形的細(xì)胞數(shù)量逐漸增加；2)對(duì)于在低濃度范圍內(nèi)(＜5mg·L-1)的TCP，MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制率的結(jié)果不穩(wěn)定，當(dāng)TCP濃度小于1mg·L-1時(shí)細(xì)胞存活抑制率出現(xiàn)負(fù)值，并且抑制率隨TCP濃度的增加，呈現(xiàn)不規(guī)律的變化；3)在低濃度范圍內(nèi)(＜30mg·L-1)，TCP對(duì)發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光抑制率與試樣濃度線性相關(guān)性不大，且當(dāng)TCP濃度低于0.5mg/L時(shí)，所得數(shù)值為負(fù)

4、，也即表示TCP反而促進(jìn)了發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光效率；4)比較三種檢測(cè)方法，當(dāng)檢測(cè)低濃度的試樣時(shí)，Vero細(xì)胞形變要明顯敏感于細(xì)胞增殖率的變化；發(fā)光細(xì)菌法檢測(cè)各濃度TCP時(shí)，若TCP濃度過(guò)低，其數(shù)值的可信度大大降低，同時(shí)，發(fā)光細(xì)菌法所用原核微生物與人類的同源性較低，難以直接反應(yīng)對(duì)人體的毒性；5)在完全相同的條件下，PVC瓶浸泡液的綜合毒性低于PVC杯的綜合毒性；UPVC管的浸泡特性不同于PVC材料，其材料浸泡液的綜合毒性明顯低于PVC材料；6)

5、PVC和UPVC材料的浸泡液綜合毒性相對(duì)較低，發(fā)光細(xì)菌法檢測(cè)此類低濃度試樣的準(zhǔn)確性不高，數(shù)據(jù)波動(dòng)較大，缺乏可信度；7)Vero細(xì)胞變形法對(duì)此類毒性較低材料的浸泡液，其檢出能力明顯高于發(fā)光細(xì)菌法；8)用Vero細(xì)胞變形法判斷水廠出水消毒副產(chǎn)物綜合毒性，在宏觀上只能給出是否產(chǎn)生對(duì)Vero細(xì)胞有毒害作用物質(zhì)的判斷；由于含量較低，不能給予定量上的判斷。 通過(guò)對(duì)Veto細(xì)胞細(xì)部形態(tài)變化機(jī)理的研究，闡明污染物致細(xì)胞變形分子標(biāo)志物，通過(guò)變形分