版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、由核盤菌[Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary]引起的油菜菌核病是一種世界性分布的重要病害。重寄生真菌盾殼霉(Coniothyriumminitans)是核盤菌的一種具有廣闊應(yīng)用前景的生防菌。前人對盾殼霉防治核盤菌的機制和防病潛力已進行了深入研究。這些機制主要側(cè)重于盾殼霉對核盤菌的重寄生作用,競爭作用和抗真菌作用,而對其降解核盤菌產(chǎn)生的草酸毒素及其產(chǎn)生的一系列生防效應(yīng)則未見報道。 草酸(Oxal
2、icacid,OA)是核盤菌產(chǎn)生的一種毒素,在核盤菌的致病過程中起著決定因子的作用。盾殼霉可以寄生核盤菌的菌落以及核盤菌引起的病斑,可見盾殼霉可以抵抗一定濃度的草酸。這種抗性的本質(zhì)是什么?本研究從盾殼霉降解草酸的角度出發(fā),對盾殼霉降解草酸的能力和影響因子,以及由此產(chǎn)生的生防效應(yīng)進行了研究,旨在發(fā)掘盾殼霉防治核盤菌的新因子,以及增強盾殼霉防治油菜菌核病的效果及穩(wěn)定性。取得了如下研究結(jié)果: 首先,對盾殼霉降解草酸的能力進行了定量分析
3、。結(jié)果表明:在含有0.8~32mmol/L草酸的改良馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液(mPDB)中培養(yǎng)盾殼霉15d(20℃),培養(yǎng)液中的草酸含量下降85.9%~91.7%。這些盾殼霉培養(yǎng)物濾液的pH值從酸性水平(pH2.9~6.3)升高至弱堿性水平(pH7.7~8.6)。此外,從這些盾殼霉培養(yǎng)物濾液中還檢測出氨。產(chǎn)生氨可能是引起培養(yǎng)液pH值升高的另一個原因。而當(dāng)mPDB中的草酸濃度達到40和80mmol/L時,盾殼霉不能生長,培養(yǎng)液中的草酸含量沒有發(fā)
4、生明顯下降。在另一個試驗中,以含有16mmol/L草酸的mPDB培養(yǎng)盾殼霉(20℃,15d),分別測定培養(yǎng)液和盾殼霉菌絲中的草酸含量,結(jié)果表明:培養(yǎng)液中草酸含量下降88.0%,菌絲提取物中沒有檢測到草酸的存在。由此證明盾殼霉具有降解草酸的能力。將油菜幼苗的根浸泡在盾殼霉培養(yǎng)物濾液中,測定其中的毒性。結(jié)果表明:盾殼霉在含有草酸(8、16、24、32mmol/L)的培養(yǎng)液中生長后(20℃,15d),濾液的毒性顯著降低,進一步證實盾殼霉具有解
5、除草酸毒害作用的能力。 進一步定量分析表明:盾殼霉降解草酸與盾殼霉菌絲有關(guān)。其證據(jù)包括:(1)盾殼霉培養(yǎng)物(mPDB+16mmol/LOA,20℃,9d)濾液(無菌絲細(xì)胞)對草酸(8mmol/L)沒有降解作用,這說明濾液中不存在降解草酸的活性物質(zhì)或活性物質(zhì)的含量很低;(2)在盾殼霉培養(yǎng)物(mPDB+16mmol/LOA,20℃,9d)中繼續(xù)添加草酸(16mmol/L),再分成兩種處理,一種處理是補充營養(yǎng)物質(zhì)(0.1%KNO3和0
6、.5%葡萄糖,w/v),另一種處理不添加任何營養(yǎng)物質(zhì),繼續(xù)振蕩培養(yǎng)(20℃,200r/min,9d),結(jié)果表明:補充營養(yǎng)物質(zhì)處理的草酸降解較不加營養(yǎng)物質(zhì)處理明顯提前。這說明盾殼霉菌絲生長與降解草酸是同步進行的。從盾殼霉菌絲中檢測到草酸脫羧酶活性。 其次,對影響盾殼霉降解草酸的因子進行了研究。結(jié)果表明:酸性環(huán)境對盾殼霉降解草酸根離子十分重要。在mPDB培養(yǎng)液中添加草酸鈉(16mmol/L)后,培養(yǎng)液的pH值為6.4,添加草酸銨(1
7、6mmol/L)后,pH值為6.2。盾殼霉在這兩種培養(yǎng)液中生長后對草酸根離子的降解率低于5%。在含草酸鈉或草酸銨的培養(yǎng)液中添加草酸(16mmol/L)后,培養(yǎng)液的pH值下降至3.5~3.6。盾殼霉在這兩種培養(yǎng)液中生長后,對草酸根離子的降解率上升至14.1%(草酸鈉處理)或36.1%(草酸銨處理)。在含草酸鈉或草酸銨的培養(yǎng)液中添加鹽酸(0.2%,v/v)后,培養(yǎng)液的pH值下降至2.8~2.9。盾殼霉在這兩種培養(yǎng)液中生長后,對草酸根離子的降
8、解率上升至63.0%(草酸鈉處理)或89.5%(草酸銨處理)。另一方面,用NaOH(1mol/L)調(diào)節(jié)含草酸(8、16、24、32mmol/L)的mPDB至pH7.0時,盾殼霉生長后降解草酸的能力顯著降低。 影響盾殼霉降解草酸效率的另一個因子是草酸濃度。在草酸濃度為8~32mmol/L范圍內(nèi),草酸濃度愈高,降解速度愈慢,反之亦然。當(dāng)濃度高于40mmol/L時,盾殼霉不能生長,因而不能降解草酸。 比較了兩個培養(yǎng)特性(色素產(chǎn)
9、生、雙鏈RNA有無和液體產(chǎn)孢)差別較大的盾殼霉菌株(Chy-1和ZS-1)降解草酸的能力。結(jié)果表明:這兩個盾殼霉菌株降解草酸的能力沒有顯著差異。 以查比培養(yǎng)液為基礎(chǔ)培養(yǎng)基研究了5種碳源(葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、可溶性淀粉)和4種氮源(硝酸鉀、硝酸銨、丙氨酸、谷氨酸)對盾殼霉降解草酸的影響。結(jié)果表明:供試5種碳源和3種氮源(硝酸鉀、丙氨酸和谷氨酸)均有利于盾殼霉菌絲生長,因而降解草酸的效率較高(>98%)。而硝酸銨不利于盾殼霉
10、菌絲生長,因而草酸降解效率較低(46.1%)。在核盤菌菌核提取物或菌絲提取物中添加草酸(8mmol/L或16mmol/L),接種盾殼霉,振蕩培養(yǎng)(20℃,200r/min,15d)后培養(yǎng)液中的草酸全部被盾殼霉降解。 第三,研究了盾殼霉降解草酸對其產(chǎn)生重寄生相關(guān)的胞外酶(β-1,3-葡聚糖酶、幾丁質(zhì)酶和蛋白酶)的影響、對這些胞外酶活性的影響以及對產(chǎn)生抗真菌物質(zhì)的影響。結(jié)果表明:盾殼霉降解草酸后,引起環(huán)境pH升高,有利于盾殼霉產(chǎn)生這
11、三種重寄生相關(guān)酶,并提高這些酶的活性。說明降解草酸有利于盾殼霉寄生核盤菌。另一方面,草酸可以誘導(dǎo)盾殼霉產(chǎn)生抑制核盤菌菌絲生長的抗真菌物質(zhì)(Anti-fungalsubstance,簡稱AFS)。盾殼霉產(chǎn)生AFS的量與培養(yǎng)液(PDB)中的初始草酸濃度(8~32mmol/L)呈正相關(guān)(P<0.05),而與盾殼霉降解草酸的效率呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。而在PDB培養(yǎng)液中添加草酸鈉時(8~32mmol/L),盾殼霉培養(yǎng)液的AFS活性低。說明草酸
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 重寄生真菌盾殼霉感應(yīng)環(huán)境pH值的分子機制及其對生防效果影響的研究.pdf
- MAPK途徑在盾殼霉產(chǎn)孢子及重寄生作用中的功能研究.pdf
- MAPK途徑在盾殼霉產(chǎn)孢及重寄生作用中的功能研究.pdf
- 盾殼霉草酸脫羧酶基因的克隆、功能驗證及生防作用研究.pdf
- 生防菌盾殼霉產(chǎn)生抗真菌物質(zhì)及其特性和防病潛力研究.pdf
- 生防真菌盾殼霉抗殺菌劑菌核凈的誘變及其抗性機制分析.pdf
- 盾殼霉產(chǎn)生真菌物質(zhì)的調(diào)控及其分子機理研究.pdf
- 核盤菌重寄生菌盾殼霉的固體發(fā)酵及分生孢子菌劑制備的研究.pdf
- 生防菌盾殼霉LaeA基因的克隆與功能研究.pdf
- 生防菌盾殼霉防治油菜菌核病的生態(tài)學(xué)基礎(chǔ)及其應(yīng)用研究.pdf
- 盾殼霉產(chǎn)生的幾丁質(zhì)酶及其作用研究.pdf
- 基于代謝組學(xué)的盾殼霉寄生核盤菌的關(guān)鍵代謝物研究.pdf
- 盾殼霉胞外蛋白酶特性、分離純化及其生防作用評估.pdf
- 植物寄生線蟲生防真菌篩選及鑒定.pdf
- 基于代謝組分析的盾殼霉寄生植物病原菌核盤菌初步機理探究.pdf
- 茶藨生柱銹重寄生菌pestalotiopsissp.的生物學(xué)特性及毒素研究
- 石油降解真菌篩選及其修復(fù)效應(yīng).pdf
- 盾殼霉真菌病毒(CmRV)基因組的分子生物學(xué)特性研究.pdf
- 盾殼霉氮代謝調(diào)控基因cmareA的功能研究.pdf
- 植物病原真菌及重寄生菌的分離鑒定與侵染性研究.pdf
評論
0/150
提交評論