基于基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控模式的MAGE家族分類及其與生物學(xué)功能吻合度的初步探討.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用全反式維甲酸(ATRA)誘導(dǎo)雌激素受體陽性的乳腺癌MCF-7細(xì)胞，RT-PCR檢測MAGE家族分子的表達(dá)，研究MAGE家族分子在全反式維甲酸誘導(dǎo)分化作用中表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)分化相關(guān)亞家族(MAGE家族堿性蛋白)隨分化誘導(dǎo)而表達(dá)增強(qiáng)，相反，腫瘤相關(guān)亞家族(MAGE家族酸性蛋白)隨分化誘導(dǎo)而表達(dá)降低。同時，利用FCM發(fā)現(xiàn)在濃度為10-6mol/L的ATRA作用下，乳腺癌MCF-7細(xì)胞出現(xiàn)G1期阻滯；利用MTT法發(fā)現(xiàn)濃度為10-6m

2、ol/L的ATRA對于MCF-7細(xì)胞具有顯著的抑制作用；利用Giemsa染色檢測ATRA對于MCF-7細(xì)胞的凋亡作用。以上實(shí)驗(yàn)初步證明了MAGE基因家族的轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控模式的預(yù)測結(jié)果的可信性，為完善MAGE家族分化相關(guān)亞家族和腫瘤相關(guān)亞家族分類和蛋白酸堿分類的假說提供了有價值的信息，為下一步研究MAGE家族蛋白與細(xì)胞增殖、分化、凋亡的關(guān)系，建立它們之間的網(wǎng)絡(luò)聯(lián)系奠定了基礎(chǔ)。同時，也在從轉(zhuǎn)錄模式上對基因家族進(jìn)行再分類研究基因功能做出了嘗試。

3、本實(shí)驗(yàn)也為研究ATRA與乳腺癌治療的關(guān)系，為臨床上使用ATRA治療實(shí)體瘤奠定了一定基礎(chǔ)。 此外，對restin調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的機(jī)制進(jìn)行了初步的研究。由于restin的高表達(dá)伴隨細(xì)胞G1期的阻滯，而CyclinD1是調(diào)節(jié)細(xì)胞周期由G1期向S期轉(zhuǎn)變的重要分子。于是，利用RT-PCR同時檢測了維甲酸誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞分化過程中不同時期restin和CyclinD1的表達(dá)情況。結(jié)果restin表達(dá)是從無到有，逐漸增強(qiáng)，CyclinD1的表