桃梨離體再生體系建立及試管苗種質(zhì)保存研究.pdf

1、本試驗(yàn)以木本果樹(shù)桃和梨的成熟種子、成年莖段為材料，進(jìn)行桃梨的再生體系建立和離體種質(zhì)保存研究。試驗(yàn)主要以山毛桃和鴨梨為主要研究對(duì)象，進(jìn)行桃和梨離體再生體系的建立、試管苗離體保存研究，并利用火焰原子吸收分光光度計(jì)對(duì)桃正常苗與莖尖枯死苗微量元素含量差異分析，以期為桃梨的離體繁殖和離體種質(zhì)保存提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： 1.桃離體再生體系建立。桃種子最佳消毒方法：75％酒精(30s)+0.1％的HgCl2(5 min)+無(wú)菌水(2

2、4 h)+0.1％的HgCl2(3 min)；種子去除種皮萌發(fā)率最高；芽苗的最佳增殖培養(yǎng)基為G+6-BA0.5 mg·L-1+IBA0.2 mg·L-1培養(yǎng)基；桃成年莖段在福州取材的最佳時(shí)期為秋季9-10月份，最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.01 mg·L-1。 2.桃胚離體培養(yǎng)和種質(zhì)保存研究。研究表明：桃胚培養(yǎng)苗頂端莖尖枯死在山毛桃、白風(fēng)、青州蜜桃等不同品種上普遍存在：培養(yǎng)基G上苗的枯死率小于MS

3、、B5、White培養(yǎng)基：變溫或適當(dāng)?shù)蜏乜梢詼p少或消除頂端莖尖枯死：培養(yǎng)基G附加蔗糖80 g·L-1可以延緩發(fā)生時(shí)間或減少莖尖枯死的數(shù)量；低濃度的6-BA和GA3能夠延緩或減輕莖尖枯死的發(fā)生，隨著濃度提高枯死率有上升趨勢(shì)。桃試管苗生根可以延長(zhǎng)保存時(shí)間，苗也比較健壯；桃最佳保存培養(yǎng)基為(G+KT0.5 mg·L-1+IBA0.2 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1瓊脂。 3.桃正常苗與頂端莖尖枯死苗子葉微量元素含量

4、差異分析。利用火焰原子吸收分光光度計(jì)檢測(cè)結(jié)果表明：在離體培養(yǎng)條件下莖尖枯死苗中鐵的含量比正常苗子葉中的含量低，元素Cr的含量比后者高；在離體培養(yǎng)枯死苗子葉中Mn的含量比室外培養(yǎng)正常苗子葉的含量低，而Cu、Zn的含量比后者高；元素Cu和Zn在離體培養(yǎng)條件下死苗的子葉中的含量比未萌發(fā)種子中的含量低，而Cr的含量比后者高。 4.梨高效再生體系的建立。研究結(jié)果表明：梨種子在離體培養(yǎng)時(shí)需去除種皮，最佳萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+30 g·L-1蔗糖

5、+6 g·L-1瓊脂，發(fā)芽率為86.67％；最佳增殖培養(yǎng)基為L(zhǎng)2培養(yǎng)基：MS+6-BA0.5 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1，增殖系數(shù)為3.12；生根最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為g3培養(yǎng)基：1/4MS+NAA 0.3 mg·L-1+IBA0 g·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1，生根率為63.26％；生根數(shù)最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：1/2 MS+NAA0 mg·L-1+IBA0.4 mg

6、·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1，生根數(shù)為4.125條/株。 5.梨試管苗離體種質(zhì)保存。研究結(jié)果表明：利用光照強(qiáng)度500 lx、添加活性炭3 g·L-1、大量元素減3/4、添加PP333 10～15 mg·L-1、瓊脂+水的空白培養(yǎng)基、添加甘露醇10 g·L-1結(jié)合30 g·L-1蔗糖、添加瓊脂8 g·L-1、添加甘露醇60 g·L-1、添加ABA0.5 mg·L-1等方法對(duì)梨試管苗進(jìn)行了保存，最好的已保存6個(gè)