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文檔簡介
1、目的:觀察不同劑量的氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low-densitylipoprotein,OX-LDL)和煙酸對脂肪細(xì)胞參與膽固醇流出的轉(zhuǎn)運(yùn)體-B族I型清道夫受體(Scavenger receptor class B type I,SR-BI)和三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A I(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)的影響,并探討其可能的機(jī)制,由此揭示脂肪細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生中的
2、作用。 方法:培養(yǎng)3T3-L1脂肪細(xì)胞,至促分化成熟后,在不同濃度的OX-LDL(0,12.5,25,50μg/ml)和煙酸(0,0.25,0.5,1.0 mmol/L)干預(yù)后,收集細(xì)胞,用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)檢測ABCA1、SR-BI、肝X受體α(Liver X receptor α,LXRα)和過氧化物酶增殖物激活受
3、體Y(Peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPAR γ)mRNA表達(dá),采用液體閃爍計(jì)數(shù)器檢測載脂蛋白A-I(Apolipoprotein A-I,apoA-I)介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出。 結(jié)果:Ox-LDL干預(yù)8小時(shí),apoA-I介導(dǎo)的膽固醇流出無明顯改變;低濃度OX-LDL干預(yù)24小時(shí)可增加脂肪細(xì)胞ABCA1、LXRa和SR-BImRNA的表達(dá),并促進(jìn)apoA-I介導(dǎo)
4、的膽固醇流出,而高濃度則無此作用;煙酸呈劑量依賴性增加脂肪細(xì)胞ABCA1和PPAR γ mRNA的表達(dá),并促進(jìn)apoA-I介導(dǎo)的膽固醇流出,但對SR-BI表達(dá)無影響。 結(jié)論: 1.脂肪細(xì)胞高度表達(dá)ABCA1,SR-BI、LXRot和PPAR γ。 2.Ox-LDL對脂肪細(xì)胞膽固醇流出具有雙重調(diào)節(jié)作用,與濃度和時(shí)間有關(guān)。小劑量OX-LDL能激活LXR-ABCA1-apoA-I通路,增強(qiáng)SR-BI轉(zhuǎn)錄,促進(jìn)脂肪細(xì)胞膽
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