PKC對(duì)糖尿病腎病患者血小板的影響及臨床意義.pdf

1、目的：探討蛋白激酶C（PKC）變化與糖尿病腎病患者出現(xiàn)血小板數(shù)目下降，生存時(shí)間縮短之間的關(guān)系，并進(jìn)一步分析血小板這些異常的臨床意義。
　　方法：1.體外實(shí)驗(yàn)部分：使用PKC激活劑 phorbolmyristateacetate（PMA）或抑制劑Staurosporine（STS）37℃下刺激正常人的洗滌血小板，流式細(xì)胞儀檢測正常洗滌血小板 PKC變化后線粒體膜電位改變、磷脂酰絲氨酸（PS）外翻，Western Blot檢測正常洗滌

2、血小板 PKC變化后凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)情況；2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分：選擇蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的糖尿病患者64例，再根據(jù)臨床檢查結(jié)果分為單純糖尿病組與糖尿病腎病組，單純糖尿病組患者無心、腎及眼底等糖尿病相關(guān)并發(fā)癥。空腹采集新鮮靜脈血，離心得到富血小板血漿(platelet rich plasma，PRP)，流式細(xì)胞儀檢測這些患者血小板線粒體膜電位變化。
　　結(jié)果：1.PMA可致正常洗滌血小板線粒體膜電位下降，凋亡蛋白caspase3裂解

3、出活化小片段。2.STS可引起正常洗滌血小板線粒體膜電位下降，血小板膜上 PS外翻增加，凋亡相關(guān)蛋白Bcl-xl、Bax表達(dá)失衡。3.特異性PKC抑制劑G?6983不引起正常洗滌血小板線粒體膜電位下降和PS外翻增加，STS致正常洗滌血小板上述變化可被 ROS清除劑有效阻斷。4.糖尿病組患者血小板線粒體膜電位較正常下降，糖尿病腎病組患者血小板線粒體膜電位較正常下降更明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1.PKC激活