納他霉素對(duì)灰葡萄孢的活性及作用機(jī)理研究.pdf

1、灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)是設(shè)施栽培和果蔬采后保鮮中的重要病原真菌,目前主要通過(guò)使用化學(xué)殺菌劑進(jìn)行防治,由此產(chǎn)生的殘留污染受到日益密切的關(guān)注,迫切需要尋找更加安全、高效的藥劑。本研究以敏感灰葡萄孢菌株為對(duì)象,測(cè)定了納他霉素(Natamycin)及多菌靈、乙霉威、腐霉利和嘧霉胺等藥劑的抑制活性,同時(shí),研究了納他霉素對(duì)菌株生物學(xué)性狀的影響、作用機(jī)理及不同試驗(yàn)條件對(duì)納他霉素穩(wěn)定性的影響,研究結(jié)果表明： 1

2、、采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了25℃下供試灰葡萄孢對(duì)納他霉素等藥劑的敏感性。結(jié)果表明,納他霉素對(duì)灰葡萄孢有較高的活性,其EC50值為37.4212mg/L;多菌靈、異菌脲和腐霉利的抑制效果最佳,EC50值分別為0.6973 mg/L、0.5315 mg/L和0.4411 mg/L;咪鮮胺、噻菌靈和嘧霉胺次之,EC50值分別為1.7181 mg/L、1.8432 mg/L和3.2956 mg/L;乙霉威的活性最差,EC50值達(dá)151.2110

3、 mg/L。 2、研究了不同溫度下納他霉素等藥劑對(duì)不同生育階段灰葡萄孢的活性。結(jié)果表明,隨溫度下降藥劑活性均有不同程度提高。其中納他霉素在低溫下對(duì)菌絲生長(zhǎng)有很高的抑制活性,5℃時(shí)EC50值為0.9840 mg/L,活性較25℃提高了38倍。5℃時(shí)乙霉威活性較25℃提高了6倍,多菌靈活性提高了10.8倍,嘧霉胺、腐霉利、噻菌靈、異菌脲、咪鮮胺的活性分別提高了9.6倍、8.2倍、4.5倍、4.1倍和30.6倍；10℃時(shí)納他霉素對(duì)分生

4、孢子萌發(fā)的抑制活性是25℃時(shí)的2.5倍,對(duì)菌核萌發(fā)的抑制活性是25℃時(shí)的1.7倍。不同生育階段菌體對(duì)藥劑的敏感性差異顯著,分生孢子對(duì)藥劑最敏感,25℃時(shí)納他霉素對(duì)分生孢子萌發(fā)的EC50是3.3239 mg/L,對(duì)菌絲生長(zhǎng)的EC50是37.4212 mg/L,對(duì)菌核萌發(fā)的抑制活性極微弱,EC50大于2000 mg/L。 3、研究了納他霉素和多菌靈對(duì)灰葡萄孢生物學(xué)性狀的影響。兩種藥劑對(duì)菌株產(chǎn)孢、產(chǎn)菌核時(shí)間無(wú)顯著影響,但納他霉素較多菌

5、靈可顯著抑制菌株產(chǎn)孢、產(chǎn)菌核,多菌靈對(duì)菌株產(chǎn)孢、產(chǎn)菌核有明顯的刺激作用。 4、研究了納他霉素在不同試驗(yàn)條件下的穩(wěn)定性。結(jié)果表明,紫外線照射可顯著促進(jìn)納他霉素分解,照射0.5 h后,降解率達(dá)54.72％。低溫能有效緩解納他霉素的降解,25℃下放置24h后,納他霉素濃度僅相當(dāng)于初始配制濃度的51.2％,而5℃下放置24h后,是初始配制時(shí)的82.3％,降解率僅為177％。加入抗氧劑后,可顯著抑制納他霉素的降解,放置20d后,加入抗氧劑

6、的處理中納他霉素有效成分含量降解率為34.84％,而空白處理的降解率為68.16％。通過(guò)研究不同PH值下納他霉素對(duì)灰葡萄孢菌絲生長(zhǎng)和分生孢子萌發(fā)的影響發(fā)現(xiàn),納他霉素在弱酸性條件下有較好的作用效果。 5、初步探討了納他霉素對(duì)灰葡萄孢的作用機(jī)理。研究表明,納他霉素對(duì)菌絲體內(nèi)含物滲漏的影響明顯。25℃下經(jīng)納他霉素處理8 h后,單位重量菌絲體可溶性糖滲漏量達(dá)到4 mg/g,較初始時(shí)提高了9倍；可溶性蛋白滲漏量達(dá)到177μg/g,為初始時(shí)

7、的2倍；電導(dǎo)率達(dá)到700μs/cm,為初始時(shí)的6倍,而其它藥劑如多菌靈、乙霉威等處理的變化均不明顯。不同溫度處理之間,溫度越低,菌絲體內(nèi)含物的滲漏量越少,納他霉素處理的變化最為明顯,5℃處理8h后可溶性糖滲漏量?jī)H為25℃處理8h后的31％。經(jīng)納他霉素處理后,可顯著降低菌絲體麥角甾醇含量,25℃下20mg/L納他霉素處理菌絲體中麥角甾醇含量為46.78μg/g,是空白對(duì)照處理的55％,培養(yǎng)溫度越低,菌絲體中麥角甾醇含量越少。納他霉素對(duì)菌株