電子束輻照對(duì)灰葡萄孢菌的抑制作用及草莓抗病能力的研究.pdf

1、以草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)為供試菌,采用電子束輻照的技術(shù)分別對(duì)灰葡萄菌分生孢子、菌絲及新鮮的草莓進(jìn)行輻照處理。采用瓊脂表面萌發(fā)法及顯微攝像觀察測(cè)定輻照對(duì)分生孢子萌發(fā)活性及形態(tài)；通過誘導(dǎo)培養(yǎng)基搖床培養(yǎng)測(cè)定不同輻照劑量對(duì)灰葡萄孢菌相關(guān)細(xì)胞壁降解酶活性的影響,初步探討了輻照對(duì)供試菌的抑菌活性及相關(guān)機(jī)理；并采用活體組織法研究了輻照對(duì)草莓的致病力及其直接輻照草莓后果實(shí)體內(nèi)相關(guān)抗性酶的活性。研究結(jié)果如下:
　　 1、

2、以灰葡萄孢病菌(Botrytis cinerea)分生孢子為研究對(duì)象,采用0.5、1.0、2.0和3.0kGy劑量電子束輻照灰葡萄孢分生孢子,分別測(cè)定0℃、5℃、10℃、15℃、20℃、25℃培養(yǎng)條件下輻照對(duì)灰葡萄孢分生孢子的萌發(fā)活性及致病力的影響。結(jié)果表明:電子束處理可顯著抑制灰葡萄孢菌分生孢子的萌發(fā)率、芽管伸長(zhǎng)及菌絲分枝的形成,延遲其達(dá)到完全萌發(fā)的時(shí)間,降低其致病力,且劑量越高,效果越明顯。1.0 kGy以上處理可顯著抑制灰葡萄孢菌

3、分生孢子的萌發(fā)活性,延緩分生孢子達(dá)到完全萌發(fā)的時(shí)間；并且溫度越低這種效果越明顯。與對(duì)照組相比,不同培養(yǎng)溫度下,1.0 kGy以上電子束處理均可顯著抑制分生孢子的萌發(fā),在5℃條件下培養(yǎng),分生孢子的萌發(fā)活性顯著降低,完全萌發(fā)時(shí)間顯著延長(zhǎng),1.0、2.0和3.0 kGy處理的分生孢子在5℃條件下達(dá)到完全萌發(fā)的時(shí)間分別為14、16和18 d；分別較對(duì)照延長(zhǎng)了2、4和6 d。芽管伸長(zhǎng)及菌絲分枝得到有效抑制,5℃條件下24 h時(shí),1.0 kGy處理

4、芽管長(zhǎng)度僅為41.42μm,為對(duì)照芽管長(zhǎng)度的65.75％,48 h時(shí),5℃、1.0 kGy處理菌絲未產(chǎn)生分枝。此外,電子束輻照可以降低分生孢子的致病力,25℃,2d時(shí),2.0kGy處理病情指數(shù)為4.17；10℃、9 d時(shí),2.0kGy處理的病情指數(shù)為2.60;5℃、15 d時(shí),2.0 kGy病情指數(shù)僅為15.28,而對(duì)照則分別高達(dá)25.00、18.36和62.50。
　　 2、以灰葡萄孢菌絲為研究對(duì)象,經(jīng)電子束輻照后采用誘導(dǎo)培養(yǎng)

5、基搖床培養(yǎng),測(cè)定細(xì)胞壁降解酶活性及菌絲的致病力。結(jié)果表明:當(dāng)酶活達(dá)到峰值時(shí),聚甲基半乳糖醛酸酶、果膠酶、羧甲基纖維素酶和β-葡萄糖苷酶對(duì)照組的酶活性依次是,424.55 u／g、436.00 u／g、35.67 u／g和306.72 u／g,而2.0 kGy輻照處理各酶活性在峰值時(shí)依次為301.01 u／g、361.41 u／g、19.05 u／g和178.35 u／g。同時(shí),輻照可以降低菌絲的致病力,25℃,2d時(shí),2.0 kGy處理

6、病情指數(shù)為2.78；10℃、8 d時(shí),2.0 kGy處理的病情指數(shù)為44.44；5℃、15 d時(shí),2.0 kGy病情指數(shù)僅為13.89,而對(duì)照則分別高達(dá)19.44、98.61和61.11。
　　 3、電子束輻照處理可以明顯延緩草莓果實(shí)的發(fā)病情況,抑制病斑直徑,并能提高與抗病相關(guān)的酶活性及各抗病物質(zhì)的含量。1.0 kGy電子束處理即可以降低草莓的發(fā)病情況,延緩發(fā)病率及病斑直徑,并且在一定程度上提高與果實(shí)自身抗病相關(guān)的酶SOD、PO

7、D、PAL的活性(P<0.05),再酶活性達(dá)峰值時(shí),25℃及5℃、1.0 kGy處理POD酶活性分別為506.67 u／g及556.67u／g,而此時(shí)25℃及5℃對(duì)照的酶活則分別為506 u／g和493.94 u／g；SOD酶活分別為69.92 u／g和254.04 u／g,分別為對(duì)照組SOD活性的1.26倍和1.54倍；對(duì)照組PAL活性分別是98.27 u／g和108.13 u／g,分別是峰值時(shí)1.0 kGyPAL活性的72.15％和