天智顆粒對(duì)腦缺血再灌自由活動(dòng)大鼠海馬細(xì)胞外液?jiǎn)伟奉惡桶被徇f質(zhì)及羥自由基水平的影響.pdf

1、中國(guó)中醫(yī)研究院博士學(xué)位論文天智顆粒對(duì)腦缺血再灌自由活動(dòng)大鼠海馬細(xì)胞外液?jiǎn)伟奉惡桶被徇f質(zhì)及羥自由基水平的影響姓名：張春穎申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)指導(dǎo)教師：杜貴友王巍20040401中國(guó)中醫(yī)研究院2001級(jí)博士研究生論文中文摘要鈉捕獲后生成的2，3一DHBA的水平，來(lái)代表羥自由基的含量。單胺類遞質(zhì)主要包括去甲腎上腺素(NA)、腎上腺素(AD)、多巴胺(DA)及其代謝產(chǎn)物～3，4一二羥基苯乙酸(DOPAC)和5羥吲哚乙酸(5一

2、HIAA)。分析柱為NucleosilC】8柱(100mm32mm，3岬)。流動(dòng)相組成：1一庚烷磺酸鈉175g，三乙胺35mL，乙腈625mL乙二胺四乙酸四鈉01g，蒸餾水930mL，共1000mL流動(dòng)相的流速為07mLmin1，工作電極750mV，增益50nA，采用外標(biāo)法定量。對(duì)方法學(xué)的各項(xiàng)指標(biāo)(線性范圍、標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)、檢測(cè)限和精密度)進(jìn)行考察。12建立鄰苯二甲醛(oPA)柱前衍生化HPLc法測(cè)定遞質(zhì)氨基酸的方法分析柱為Nucl

3、eosilc18柱(100mm3’mm，3“m)。流動(dòng)相組成：O1m01L’1NaH2P04，o5rm01L。1EDTA，20％甲醇(v：v)，pH51。流速為05mLrnin_1，工作電壓850mV，增益50nA。衍生液組成：0PAllmg，1moI‘L。Na2s03O25mL，乙醇025mL，o1molL。1硼酸緩沖液(pH74)o45mL。每1mL氨基酸標(biāo)準(zhǔn)，加入20止，衙生液；每20皿透析液，加入04此衍生液；每支樣品均于進(jìn)樣前

4、10min于室溫下進(jìn)行衍生【105郴”。經(jīng)OPA柱前衍生化后，用HPLcEcD測(cè)定遞質(zhì)氨基酸一谷氨酸(G1u)，半胱氨酸(Cys)，v一氨基丁酸(GABA)，牛磺酸(Tau)和精氨酸(Arg)，采用外標(biāo)法定量。對(duì)方法學(xué)的各項(xiàng)指標(biāo)(同上)進(jìn)行考察。13動(dòng)物分組和藥物處理實(shí)驗(yàn)分為6組：假手術(shù)組、模型組、都可喜組和大、中、小劑量的Tz組，每組5只sD大鼠。給藥量：都可喜組8mg‘kg～，TZ大、中、小劑量分別為39kg～、159蜒。和0759

5、’延～，假手術(shù)組和模型組給予自來(lái)水，連續(xù)i92周。14不完全腦缺血再灌動(dòng)物模型的制備和海馬定位手術(shù)給藥第13天，用2％戊巴比妥鈉麻醉大鼠(40mgk昏1，ip)，沿頸中部用手術(shù)刀切開(kāi)頸部皮膚，分別暴露左、右側(cè)頸總動(dòng)脈，于左、右側(cè)頸總動(dòng)脈下面穿一根∥白色絲線(結(jié)扎線)，并分別在靠近左右頸總動(dòng)脈的4。白色絲線赴穿一根04黑色絲線(放開(kāi)線)，0。黑色絲線分別由皮下通道從頸后部的左右側(cè)穿出，礦白色絲線從頸中部拉出，縫合頸中部皮膚。此后，將大鼠固