轉錄共激活因子TORCs在視網膜神經節(jié)細胞損傷修復中的作用及其機制研究.pdf

1、中山大學碩士學位論文轉錄共激活因子TCs在視網膜神經節(jié)細胞損傷修復中的作用及其機制研究姓名：王家偉申請學位級別：碩士專業(yè)：眼科學指導教師：鄧娟20090510巾山人學頌l：學位論文焦顯微鏡觀察TORCs在視網膜的細胞定位。采用玻璃體內注射NMDA激活谷氨酸受體引起RGCs細胞內C∥濃度升高或注射Forskolin升高cAMP濃度觀察TORCs的位置變化。2建立視網膜缺血動物模型，研究視網膜缺血再灌注后RGCs中TORCs的亞細胞定位變化

2、。采用大鼠眼動脈結扎的方法建立急性視網膜缺血模型。我們將成年雄性SD大鼠隨機分為兩組，一組為對照組(3只6眼)，另一組為缺血再灌注組(9只18眼)。缺血再灌注組大鼠結扎右眼視神經鞘內的眼動脈，缺血60min，隨后松開血管夾，造成再灌注；分別于再灌后15min、lh、6h、12h、24h、48h后摘除眼球，固定、切片后行原位雜交、熒光免疫組化，觀察TORCs在RGCs中的亞細胞定位變化。結果：RT—PCR和Westernblotting發(fā)

3、現SD大鼠視網膜上有TORCl、TORC2mRNA的表達，但沒有檢測到TORC3的表達。同TORCl相比，TORC2蛋白的濃度相對低。在視網膜切片中，TORClmRNA主要表達在RGCs。靜息狀態(tài)下TORCl主要定位在RGCs的胞漿中，在細胞核中定位很少。增加細胞內Ca2或CAMP的濃度可以促進TORCl入核。在SD大鼠視網膜缺血再灌注15min后均可見到TORCl明顯向核內聚集，1h后主要集中在核內，6h后大部分又移出細胞核。對照組中