人胃癌SGC7901細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用.pdf

1、以人胃癌SGC7901細(xì)胞為研究對(duì)象，在確定細(xì)胞生長(zhǎng)條件和生長(zhǎng)規(guī)律的基礎(chǔ)上，對(duì)SGC7901細(xì)胞進(jìn)行了研究。 通過(guò)比較胃癌細(xì)胞SGC7901在DMEM和RPMI1640兩種常規(guī)培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)形態(tài)，以及流式細(xì)胞儀分析胃癌細(xì)胞SGC7901在DMEM和RPMI1640兩種常規(guī)培養(yǎng)基中的死亡率。最終確定，人胃癌SGC7901細(xì)胞培養(yǎng)于含10％小牛血清、青霉素100 U/mL和鏈霉素1.0×10-4g/mL的DMEM培養(yǎng)液中，在37℃、

2、5％CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)傳代培養(yǎng)。 采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法，繪制了胃癌細(xì)胞SGC7901的生長(zhǎng)曲線，胃癌細(xì)胞SGC7901一般在傳代2到3天可以達(dá)到對(duì)數(shù)期。 通過(guò)比較當(dāng)前科研中所用的常規(guī)細(xì)胞保存方法如細(xì)胞保存液，乙醇，NaCl等，對(duì)細(xì)胞保存條件進(jìn)行摸索，結(jié)果表明，在室溫保存5天時(shí)間里，市售的細(xì)胞保存液和0.85％NaCl均有相當(dāng)理想的保存效果。 對(duì)細(xì)胞染色體進(jìn)行核型分析。結(jié)果表明，胃癌細(xì)胞SGC7901適宜的秋水仙素濃度

3、為0.02-0.4μg/mL,低滲時(shí)間在20-30min之間，胰酶消化時(shí)間為1.5min顯帶效果較適宜。胃癌細(xì)胞SGC7901的染色體為亞三倍體，一般在65條至68條不等，第4、11、16、17、21、22對(duì)共6對(duì)染色體類(lèi)型與正常人染色體類(lèi)型相比發(fā)生了明顯的變化，說(shuō)明胃細(xì)胞在癌變過(guò)程中染色體具有亞三倍體化的特點(diǎn)。 采用MTT法、細(xì)胞核染色、瓊脂糖凝膠電泳、流式細(xì)胞術(shù)等方法，研究了多糖對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901的影響。結(jié)果表明，多