吸煙大鼠肺組織水通道蛋白4和粘蛋白5AC的表達(dá)及其與一氧化氮的關(guān)系.pdf

1、吸煙被認(rèn)為是慢性阻塞性肺疾病最重要的危險(xiǎn)因素。煙草煙霧通過(guò)多種化學(xué)物質(zhì)引起肺組織復(fù)雜的炎癥反應(yīng)，多種免疫細(xì)胞、炎癥介質(zhì)、蛋白酶、活性氧化物參與其中，導(dǎo)致了以氣道慢性炎癥和阻塞為中心的肺部病變。在這個(gè)過(guò)程中粘液產(chǎn)生過(guò)多和排出障礙在氣道阻塞中的作用不可忽視。粘液濃縮而聚集在氣道直接增加了肺的非彈性阻力，而粘液的成分和纖毛功能又與氣道表面含水量有密切關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)水通道蛋白4(aquaporin4，AQP4)表達(dá)于氣道粘膜上皮組織，是水在跨上

2、皮轉(zhuǎn)運(yùn)中的重要通道蛋白，對(duì)氣道表面液體平衡產(chǎn)生重要的調(diào)節(jié)作用，因此研究吸煙所致的肺部炎癥環(huán)境中AQP4表達(dá)的變化對(duì)慢性阻塞性肺疾病氣道中粘液分泌和排出機(jī)制進(jìn)一步闡明具有重要意義。
　　活性氧-抗氧化物失衡的重要性在吸煙致炎的諸多機(jī)制中業(yè)已得到公認(rèn)，香煙煙霧本身含有以及炎癥細(xì)胞產(chǎn)生的活性氧化性物質(zhì)廣泛參與了組織的損傷過(guò)程。氣道上皮組織增殖活躍，更新速度快，因而更易受到氧化物質(zhì)的損傷，初步探討表達(dá)于氣道上皮組織的AQP4及粘蛋白5AC

3、(mucin5AC,MUC5AC)與活性氧化物的關(guān)系可為今后進(jìn)一步明確活性氧-抗氧化物失衡在慢性阻塞性肺疾病中的地位和水通道蛋白在肺組織表達(dá)調(diào)控的機(jī)制提供研究思路。
　　目的:
　　研究煙草煙霧吸入對(duì)大鼠肺組織AQP4和MUC5AC的表達(dá)的影響及其與支氣管肺泡灌洗液內(nèi)一氧化氮代謝物水平的相關(guān)關(guān)系，探討氧化應(yīng)激對(duì)肺部水轉(zhuǎn)運(yùn)和粘液分泌的影響。
　　方法:
　　復(fù)制香煙煙霧吸入大鼠模型，免疫組化法觀察AQP4在肺組織內(nèi)

4、的表達(dá),平均光密度法比較模型組和空白組大鼠AQP4的表達(dá)差異；半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測(cè)肺組織內(nèi)AQP4及MUC5ACmRNA的表達(dá)水平；硝酸還原酶法測(cè)定各組大鼠支氣管肺泡灌洗液內(nèi)一氧化氮代謝產(chǎn)物的濃度，Pearson法分析模型組AQP4、MUC5ACmRNA的表達(dá)水平與支氣管肺泡灌洗液內(nèi)一氧化氮代謝物濃度之間的相關(guān)關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1、成功復(fù)制香煙煙霧吸入致大鼠肺氣腫模型
　　2、免疫組織化學(xué)染色顯示：A

5、QP4在空白對(duì)照組呈強(qiáng)陽(yáng)性染色，在模型組呈弱陽(yáng)性染色，兩者平均光密度值分別為35.39±5.37和26.07±4.35，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p＜0.05）。
　　3、模型組動(dòng)物和空白對(duì)照組動(dòng)物支氣管肺泡灌洗液(BALF)一氧化氮代謝產(chǎn)物含量分別為7.04±1.50，18.52±5.89，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.01）
　　4、一氧化氮代謝產(chǎn)物含量與AQP4mRNA的表達(dá)之間呈顯著負(fù)相關(guān)系（r=-0.798，p＜0.01）