EphA2與MMP2在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景：
　　 膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性神經(jīng)上皮性惡性腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的44.69％，目前仍然是人類尚未解決的主要疾病之一。盡管我們采取手術(shù)切除、放射治療和化療，腫瘤仍然頻繁復(fù)發(fā)，預(yù)后十分不理想，最惡性膠質(zhì)瘤患者從診斷到死亡的平均生存期僅僅12個(gè)月。其預(yù)后差部分原因是因?yàn)榛熕幬锊荒芡ㄟ^血腦屏障和腫瘤對(duì)放射治療不敏感，部分原因是膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖快、能抵抗凋亡、向周圍腦組織浸潤性生長和腫瘤血管的迅速生成，但治療失敗的主

2、要原因歸于膠質(zhì)瘤的侵襲性生長模式。目前的治療模式不能夠顯著的延長惡性膠質(zhì)瘤患者的生存時(shí)間，就是用最新的分子靶向治療，膠質(zhì)瘤的發(fā)病率和死亡率依然維持在較高的水平。因此，膠質(zhì)瘤的治療目前仍是世界公認(rèn)的難題，全世界神經(jīng)外科醫(yī)生正在尋找有效的能提高膠質(zhì)瘤患者預(yù)后和生存質(zhì)量的治療措施。
　　 受體型酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase,RTK)高表達(dá)于人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞和膠質(zhì)瘤細(xì)胞株，酪氨酸激酶的存在增加了膠質(zhì)瘤的惡性

3、程度，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞分裂，抑制癌細(xì)胞凋亡，刺激腫瘤血管的形成。這些激酶包括表皮生長因子受體(EGFR)，肝細(xì)胞生長因子（HGF）受體，血小板衍生生長因子受體(PDGFR)，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體(VEGFR)等。當(dāng)然，在高級(jí)別膠質(zhì)瘤里抑癌基因的缺失也顯著增加了腫瘤的惡性程度。
　　 在人類基因組，生促紅素人肝細(xì)胞 (erythropoietin-producing hepatocelluar cell，Eph)受體是最大的酪氨

4、酸激酶受體（RTK）家族，由16個(gè)Eph受體和9個(gè)配體組成，在人類的發(fā)育和疾病方面起著重要作用。EphA2是Eph亞家族受體成員中發(fā)現(xiàn)具有酪氨酸激酶活性的第一個(gè)基因編碼產(chǎn)物，高表達(dá)于不同類型的腫瘤，包括：胰腺癌、肺癌、黑色素瘤、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、和乳腺癌等。EphA2可以通過信號(hào)傳導(dǎo)參與胚胎發(fā)育，尤其是神經(jīng)系統(tǒng)及血管系統(tǒng)的發(fā)生和發(fā)育，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化,維持細(xì)胞之間的粘附，促進(jìn)血管的增生和調(diào)節(jié)血管的存活。而EphA2異常表達(dá)時(shí)同樣可以

5、通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生、血管生成、侵襲、浸潤和轉(zhuǎn)移。EphA2在膠質(zhì)瘤組織中也呈高表達(dá)并且表達(dá)程度與病理分級(jí)密切相關(guān)。
　　 基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrix metalloproteinase MMPs）是一組調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrixc,ECM）的鋅離子依賴的內(nèi)肽酶。到目前為止，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了28種，動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了25種，人類發(fā)現(xiàn)了24種。MMP可根據(jù)自身結(jié)構(gòu)和降解底物的不同分為膠原酶、明膠酶、間質(zhì)

6、溶解素、基質(zhì)溶解因子、膜型基質(zhì)金屬蛋白酶和其他種類等六類。其在各種生理和病理?xiàng)l件下降解細(xì)胞外基質(zhì)起著重要的作用。許多疾病如癌癥、心血管疾病和關(guān)節(jié)炎的的發(fā)生與MMP的表達(dá)有關(guān)。大量證據(jù)顯示MMP通過對(duì)腫瘤表面細(xì)胞外基質(zhì)的降解增加腫瘤對(duì)周圍正常組織的侵襲性和轉(zhuǎn)移能力。在人類膠質(zhì)瘤細(xì)胞，MMP的升高水平與腫瘤細(xì)胞的侵襲能力有顯著的相關(guān)性。諸多MMP成員中，膠質(zhì)瘤主要分泌明膠酶（MMP2和MMP9）和膜型基質(zhì)金屬蛋白酶，其中MMP2的表達(dá)而非M

7、MP9可能與膠質(zhì)瘤的侵襲性更為相關(guān)。
　　 研究表明：EphA2過表達(dá)可以通過FAK依賴方式誘導(dǎo)MMP2的生成。兩者雖然都高表達(dá)于膠質(zhì)瘤組織中，但是二者在人腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)的相互關(guān)系尚無相關(guān)報(bào)道。本課題著重研究EphA2和MMP2在不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況和兩者相關(guān)性，旨在為進(jìn)一步揭示EphA2對(duì)膠質(zhì)瘤侵襲性的影響。
　　 研究目的：
　　 探討人腦膠質(zhì)瘤和正常腦組織中EphA2和MMP2蛋白的表達(dá)水平和兩者

8、的相關(guān)性。
　　 研究方法：
　　 以廣州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2007年3月～2008年9月收治的69例膠質(zhì)瘤患者作為研究對(duì)象，并選取10例顱腦損傷或腦出血患者行內(nèi)減壓手術(shù)時(shí)的腦組織標(biāo)本作為對(duì)照組，采用免疫組化SP法同時(shí)檢測膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中EphA2和MMP2的蛋白表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、69例膠質(zhì)瘤組織和10例正常腦組織中EphA2蛋白的陽性率分別為69.6％(48/69)和1

9、0％(1/10)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；低級(jí)別膠質(zhì)瘤 (Ⅰ、Ⅱ級(jí))與高級(jí)別膠質(zhì)瘤(Ⅲ、Ⅳ級(jí)) EphA2蛋白的陽性率分別為37.0％(10/27)和90.5％(38/42)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 2、EphA2在不同的性別、年齡，腫瘤部位和大小不同的患者膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)沒有顯著的差異。
　　 3、69例膠質(zhì)瘤組織和10例正常腦組織中MMP2蛋白的陽性率分別為47.8％(33/69)和0％

10、(0/10)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＝0.01)；低級(jí)別膠質(zhì)瘤 (Ⅰ、Ⅱ級(jí))與高級(jí)別膠質(zhì)瘤(Ⅲ、Ⅳ級(jí)) EphA2蛋白的陽性率分別為14.8％(4/27)和69.0％(29/42)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 4、MMP2在不同的性別、年齡，腫瘤部位和大小不同的患者膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)沒有顯著的差異。
　　 5、同一膠質(zhì)瘤組織中EphA2與MMP2的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.660，P﹤0.01。