金雀根對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、目的：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是一種以關(guān)節(jié)病變?yōu)橹鞯穆匀硇悦庖咝约膊?，屬于中醫(yī)“痹證”范疇，它可造成關(guān)節(jié)各種組織如軟骨、韌帶、肌腱、骨骼的破壞，導(dǎo)致生活質(zhì)量下降甚至致殘。因其病程遷延，常呈慢性經(jīng)過，日久可使心、肺、腎、動(dòng)脈、血管等受累，嚴(yán)重影響人體健康。目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的病因及機(jī)制尚未完全明了，至今無特效療法，而中醫(yī)藥治療本病顯示了一定的優(yōu)勢。在名老中醫(yī)汪履秋臨床經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，汪悅導(dǎo)師提出了肝腎虧虛為病之本，風(fēng)寒濕邪乃病之標(biāo)。臨床應(yīng)

2、用培補(bǔ)肝腎，祛風(fēng)寒濕，活血通絡(luò)法治療，有較好療效。金雀根在治療中顯示出了突出的作用。因此對金雀根藥物在實(shí)驗(yàn)方面進(jìn)行研究，探討金雀根藥物在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的免疫作用。 方法：實(shí)驗(yàn)研究分為3個(gè)部分：(1)以昆明大鼠為研究對象，建立佐劑性關(guān)節(jié)炎模型，設(shè)正常組、模型組、金雀根高劑量組、金雀根中劑量組、金雀根低劑量組、雷公藤多甙片組系，進(jìn)行對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠造模足關(guān)節(jié)體積的影響、對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)腫脹度的影響、各組佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠踝

3、關(guān)節(jié)組織病理改變輕重程度的比較的研究。(2)以昆明小鼠為研究對象，建立Ⅱ型膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎模型，設(shè)正常組、模型組、金雀根高劑量組、金雀根中劑量組、金雀根低劑量組、雷公藤多甙片組系，進(jìn)行對CIA小鼠足腫脹，關(guān)節(jié)炎發(fā)生率及嚴(yán)重性的評價(jià)、對CIA小鼠左足體積的影響、對CIA小鼠關(guān)節(jié)腫脹度的影響、對CIA小鼠血清抗體的影響的研究。(3)以昆明小鼠為研究對象，建立Ⅱ型膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎模型，設(shè)正常組、模型組、金雀根高劑量組、金雀根中劑量組、金雀根低劑量

4、組、雷公藤多甙片組系，進(jìn)行對CIA小鼠T淋巴細(xì)胞增殖的影響、對CIA小鼠T淋巴細(xì)胞粘附能力的影響、對CIA小鼠原代滑膜細(xì)胞增殖能力和培養(yǎng)上清液細(xì)胞因子影響、對CIA小鼠脾細(xì)胞MMP2、TIMP-2表達(dá)的影響 結(jié)果：(1)對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：①金雀根高、中劑量組關(guān)節(jié)炎評分明顯低于模型組；②金雀根高、中、低劑量組足跖體積均小于模型組，兩者相比差異顯著；③大鼠造模后6、10天，金雀根高、中劑量組關(guān)節(jié)腫脹度小于模型組

5、，兩組相比差異顯著；④金雀根高、中劑量組的大鼠踝關(guān)節(jié)組織病理改變明顯較輕，與模型組相比差異顯著。(2)對小鼠Ⅱ型膠原關(guān)節(jié)炎的影響及機(jī)理實(shí)驗(yàn)結(jié)果：對小鼠足腫脹，關(guān)節(jié)炎發(fā)生率及嚴(yán)重性的評價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：金雀根高、中劑量組可明顯減輕關(guān)節(jié)炎程度和延遲關(guān)節(jié)炎起始發(fā)生，其關(guān)節(jié)炎評分明顯低于模型組。(3)對小鼠Ⅱ型細(xì)胞免疫學(xué)研究結(jié)果：①對小鼠脾T淋巴細(xì)胞增殖的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：金雀根高、中劑量組在1640培養(yǎng)液中及ConA刺激下，脾細(xì)胞刺激指數(shù)明顯低

6、于模型組；②對CIA小鼠脾細(xì)胞粘附Ⅱ型膠原的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：金雀根高、中、低劑量組脾細(xì)胞粘附Ⅱ膠原水平均低于模型組，與模型組相比，有顯著性差異；③對小鼠致敏脾T淋巴細(xì)胞粘附能力的實(shí)驗(yàn)顯示：金雀根高、中劑量組粘附百分?jǐn)?shù)均低于模型組，與模型組相比，有顯著性差異；④對CIA小鼠原代滑膜細(xì)胞增殖能力的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：金雀根高、中劑量組小鼠滑膜細(xì)胞增殖小于模型組，與模型組相比，有顯著性差異；⑤對小鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)上清液IL-1β、TNF-α含量

7、的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：金雀根高、中、低劑量組的細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-1β、TNF-α水平明顯低于模型組，有顯著差異；⑥對CIA小鼠脾細(xì)胞MMP2、TIMP-2表達(dá)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：降低小鼠脾細(xì)胞MMP-2表達(dá)，升高小鼠脾細(xì)胞TIMP-2表達(dá)。 結(jié)論：金雀根可明顯減輕佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠足腫脹程度、踝關(guān)節(jié)組織病理改變，降低關(guān)節(jié)炎評分。金雀根能抑制CIA小鼠足爪腫脹，減少關(guān)節(jié)炎發(fā)生率；抑制CIA小鼠T淋巴細(xì)胞增殖、脾細(xì)胞粘附Ⅱ型膠原、致敏脾