淫羊藿總黃酮對腎陽虛小鼠腎臟和性腺雄激素受體基因表達的影響.pdf

1、本文研究淫羊藿全草中黃酮類成分對腎陽虛小鼠腎臟和性腺雄激素受體表達的影響，為淫羊藿總黃酮雄激素樣作用機制的研究以及腎陽虛的有效治療途徑提供實驗依據(jù)。 淫羊藿為常用的補腎壯陽中藥，本實驗研究從淫羊藿全草中提取的黃酮類化合物對腎陽虛小鼠雄激素受體基因表達的影響。實驗采用10倍量70％乙醇回流提取，重復2次，石油醚，聚酰胺柱層析分離純化，獲得淫羊藿總黃酮 (TFE)；再將70只ICR雄性小鼠每組10只隨機分為7組，分別為正常對照組、模

2、型對照組、金匱腎氣丸陽性組、申基睪酮陽性組、TFE小劑量給藥組、TFE中劑量給藥組和TFE大劑量給藥組；除正常組外，其余六組均腹腔注射氫化可的松1.25 mg/kg造模14天，正常組腹腔注射等體積生理鹽水；根據(jù)藥典和小鼠體重分別給TFE小、中、大劑量組以29.3 mg/kg、58.5 mg/kg和117.2 mg/kg的TFE，陽性組分別以6 g/kg金匱腎氣丸和1.3 mg/kg甲基睪酮片溶液灌胃，正常組和模型對照組以等體積蒸餾水灌胃

3、14天；實驗動物摘眼球采血后引頸處死，放射免疫法測血清中睪酮的含量；取腎臟、性腺，分別用免疫組織化學和實時定量RT-PCR的方法檢測雄激素受體基因在蛋白質表達水平，和在mRNA水平的表達情況。 結果表明： 1．模型組小鼠的體重小于正常組，差異極顯著(P<0.01)；TFE大劑量組小鼠體重大于模型組(P<0.05)，但與正常組比較仍有顯著差異(P<0.05)；TFE中劑量組小鼠體重較模型組大(P<0.05)，與正常組比較無

4、顯著差異(P>0.05)；TFE小劑量組小鼠體重與正常組接近(P>0.05)，且與模型組相比，差異極顯著(P<0.01)。以上結果顯示，模型組實驗小鼠的體重較正常組明顯下降，而TFE處理則可以緩解小鼠體重下降的癥狀，其中以TFE小劑量組效果最為明顯。 2．模型組血清睪酮的含量明顯低于正常組，差異極顯著(P<0.01)；TFE小劑量組與正常組接近(P>0.05)，且與模型組相比，差異極顯著(P<0.01)；TFE大劑量組睪酮含量高

5、于模型組，但與正常組之間仍有顯著差異(P<0.05)。以上結果說明，模型組血清睪酮的含量較正常組明顯下降， TFE各劑量均可抑制其下降，提高小鼠血清中睪酮的含量，其中以小劑量組效果最為明顯。 3．免疫組化結果顯示，腎臟和性腺模型組AR的吸光度值均低于正常組，差異極顯著(P<0.01)；腎臟TFE大、中、小劑量組與模型組比較表達量均上升，吸光度值有顯著差異(P<0.05)；性腺TFE大劑量組AR吸光度值大于模型組，但與正常組比較仍

6、有顯著差異(P<0.05)，TFE小劑量組與模型組比較，差異極顯著(P<0.01)。以上結果說明，模型組AR在腎臟和性腺細胞中表達量較正常組明顯下降，TFE能在一定程度上逆轉其下降，上調AR的表達，其中以TFE小劑量效果最佳。 4.實時定量RT-PCR結果顯示，與正常組比較，模型組AR mRNA水平明顯降低(P<0.01)；性腺TFE大、中、小劑量組與模型組比較，AR mRNA表達量均上升，差異顯著(P<0.05)，且與正常組比

7、較無顯著差異(P>0.05)；腎臟TFE大、中劑量組吸光度值大于模型組，與正常組比較無顯著差異(P>0.05)，TFE小劑量組AR mRNA表達量與正常組比較無顯著差異(P>0.05)，且大于模型組，差異極顯著(P<0.01)。以上結果說明，腎陽虛小鼠AR mRNA表達量下降，TFE能夠抑制其下降，提高AR mRNA表達量，從而減輕過量糖皮質激素對機體造成的傷害，其中以TFE小劑量效果最佳。 以上實驗結果表明，TFE具有明顯的雄