珍珠層可降解人工骨的生物相容性及其在脊柱融合中的應(yīng)用.pdf

1、目的:1.探討天然生物材料珍珠層作為體內(nèi)植入材料的生物安全性.2.闡明珍珠層與聚乳酸復(fù)合后形成的人工骨材料在體外培養(yǎng)環(huán)境中對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.3.研究珍珠層復(fù)合人工骨在脊柱橫突間融合模型中的成骨和降解機(jī)理.方法:1.在體外培養(yǎng)的第三代成骨細(xì)胞中分別加入珍珠層(實(shí)驗(yàn)組)、橡膠(對(duì)照組)的材料浸提液,觀察細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞膜和超微結(jié)構(gòu)的變化;通過BrdU核摻入法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況、通過MTT法檢測(cè)成骨細(xì)胞代謝活性.2.將珍珠層復(fù)合人工骨浸

2、提液作為實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組單純加細(xì)胞培養(yǎng)液,與成骨細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)后通過中性紅法檢測(cè)成骨細(xì)胞活性;考馬斯亮藍(lán)測(cè)定細(xì)胞蛋白含量;金氏比色法檢測(cè)細(xì)胞堿性磷酸酶活性.3.將珍珠層復(fù)合人工骨與人成骨細(xì)胞體外復(fù)合培養(yǎng),采用倒置相差顯微鏡、掃描電鏡、透射電鏡及熒光顯微鏡檢測(cè),觀察人成骨細(xì)胞在珍珠層復(fù)合人工骨上的粘附能力和生物學(xué)行為.4.將珍珠層復(fù)合人工骨(實(shí)驗(yàn)組)、聚乳酸(對(duì)照組)與人成骨細(xì)胞共同培養(yǎng),觀察細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞活性、堿性磷酸酶(ALP)活性和基質(zhì)

3、鈣化情況.5.在犬L4-5橫突間植入珍珠層復(fù)合人工骨,L2-3橫突去除骨皮質(zhì)作為對(duì)照組,術(shù)后6、12、18周處死,取出相關(guān)組織作影像學(xué)、掃描電鏡、組織學(xué)檢測(cè),觀察骨組織生長(zhǎng)情況.結(jié)論:1.珍珠層具有良好的生物相容性,可作為骨替代材料應(yīng)用于骨缺損修復(fù).2.珍珠層復(fù)合人工骨材料對(duì)成骨細(xì)胞未產(chǎn)生毒性反應(yīng).3.珍珠層復(fù)合人工骨材料有利于成骨細(xì)胞的粘附、增殖和分化.4.珍珠層復(fù)合人工骨可促進(jìn)成骨細(xì)胞的體外成骨能力.5.珍珠層復(fù)合人工骨在體內(nèi)可降解