可降解鎂鋅合金與肝外膽管上皮細(xì)胞生物相容性及其在膽總管中降解行為的研究.pdf

1、研究目的：
　　目前臨床上對可降解膽道支架有迫切需求。本課題旨在研究可降解鎂鋅合金材料與肝外膽管上皮細(xì)胞（MEBDECs）的生物相容性及其在膽總管中的降解行為。
　　材料和方法：
　　本課題包括體內(nèi)外的動物實驗、細(xì)胞實驗和降解實驗。具體如下：鎂鋅合金支架植入家兔膽總管后，檢測術(shù)前和術(shù)后重要血生化指標(biāo)的變化；膽總管、肝、腎組織切片作HE染色和免疫組化檢測；支架植入膽總管后作CT掃描檢查；膽總管中取出的支架作失重和掃描電鏡

2、檢查；在體外實驗中，原代的肝外膽管上皮細(xì)胞與不同濃度的鎂鋅合金浸提液培養(yǎng)，作MTT評估其毒性、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期和凋亡；電化學(xué)試驗、浸泡、析氫試驗等方法用來評估鎂鋅合金在膽汁中的降解速率；樣本表面作掃描電鏡和元素圖譜分析。
　　研究結(jié)果：
　　生物相容性：
　　1.體內(nèi)實驗：支架植入家兔膽總管后，其術(shù)前術(shù)后的重要血生化指標(biāo)水平無明顯變化。膽總管等組織沒有明顯的壞死和炎癥改變。鎂鋅合金支架植入后會引起膽總管組織中ca

3、spase3基因表達(dá)降低。
　　2.體外細(xì)胞學(xué)實驗：MTT檢測表明：20％-40%濃度的鎂鋅合金浸提液對MEBECs的生長無明顯影響。流式細(xì)胞儀檢查發(fā)現(xiàn):140%濃度的浸提液會引起細(xì)胞凋亡，100%濃度的浸提液會導(dǎo)致MEBECs細(xì)胞周期S期阻滯和導(dǎo)致細(xì)胞壞死。RT-PCR結(jié)果表明，40%濃度的浸提液會引起B(yǎng)ax、Bax/Bcl-2、NF-κ B、caspase-3表達(dá)增高。
　　降解行為：
　　1.體外實驗。鎂鋅合金圓

4、片在膽汁中浸泡1、4、7和10天后,其重量分別減少了2.5、14.1、15.4和14.2 mg。相比于在Hanks液中，在膽汁中浸泡10天后的樣本表面有更多的降解產(chǎn)物。鎂鋅合金在膽汁中的降解速率快于其在Hanks液中、其在膽汁中的交流阻抗比在Hanks液中低。
　　2.體內(nèi)實驗。鎂鋅合金支架植入后一周幾乎無明顯降解，三周后膽總管中僅剩有9%的支架。鎂鋅合金在膽總管中的降解率約為0.107 mm2year-1。CT和掃描電鏡也證明了