CALM1基因和GHR基因SNP多態(tài)性與青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸（AIS）關(guān)聯(lián)性初步研究.pdf

1、研究背景：青少年型特發(fā)性脊柱側(cè)凸(AIS)是青少年和兒童脊柱畸形最常見的類型。目前還沒有確切的理論來闡述側(cè)凸發(fā)生的原因和機(jī)制，也沒有一種可靠的方法來預(yù)測哪種類型的側(cè)凸會(huì)進(jìn)行性加重，因此側(cè)凸不斷加重的患者的治療往往被忽略和耽擱，以至造成嚴(yán)重的脊柱畸形，這種畸形最終將使患者的心肺功能受損，少數(shù)甚至夭折。AIS的病因?qū)W研究覆蓋了多個(gè)領(lǐng)域：從不同動(dòng)物模型到AIS病人的血及活體標(biāo)本的組織學(xué)、免疫熒光、遺傳及分子生物領(lǐng)域的研究，再到AIS患者的影像

2、學(xué)、激素、神經(jīng)學(xué)研究等等。但是學(xué)者們的研究結(jié)果互不統(tǒng)一，甚至相互矛盾。近年來，學(xué)者們傾向于認(rèn)為AIS的結(jié)締組織異常和肌肉異常等改變更可能是既發(fā)改變，而非原發(fā)病因。隨著對(duì)AIS病因?qū)W研究的不斷深入，AIS的分子遺傳學(xué)研究成為了病因?qū)W研究的熱點(diǎn)。 然而，當(dāng)前AIS的遺傳學(xué)研究采用的傳統(tǒng)研究方法和統(tǒng)計(jì)方法沿襲了單基因病的研究模式，在研究AIS這一多基因復(fù)雜疾病時(shí)存在著缺陷，不同研究所得的結(jié)果互不支持，且難以重復(fù)，因此也就有必要采用一種

3、新的研究方法和統(tǒng)計(jì)手段來進(jìn)行AIS的遺傳病因研究。 研究目的： 1、明確AIS候選基因(CALM1基因和GHR基因)在AIS發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮的效應(yīng)，依據(jù)研究結(jié)果提出可能AIS病因?qū)W假說。 2、揭示各候選基因多態(tài)性與AIS危險(xiǎn)因素是否存在交互效應(yīng)和基因－基因交互效應(yīng)。 3、探討篩選所得陽性基因多態(tài)性與AIS臨床PUMC分型有無關(guān)聯(lián)，期望在基因水平進(jìn)一步豐富PUMC分型的內(nèi)容。 研究方法：采用1：1匹配

4、病例－對(duì)照研究方法。病例組為嚴(yán)格診斷標(biāo)準(zhǔn)入選的青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸患者，同時(shí)收集相應(yīng)的性別年齡匹配的對(duì)照樣本。在獲得知情同意后取外周靜脈血提取DNA。根據(jù)侯選基因的SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR方法擴(kuò)增產(chǎn)物，進(jìn)行基因測序，使用關(guān)聯(lián)分析、多位點(diǎn)聯(lián)合分析的方法將所的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，研究病例組與對(duì)照組之間的多態(tài)性分布差異，并進(jìn)一步研究基因與基因之間的相互關(guān)系。 結(jié)論： 1、CALM1基因啟動(dòng)子區(qū)的-16C＞T位點(diǎn)CC基因型

5、可能是AIS的易感基因之一。它引起的鈣調(diào)蛋白轉(zhuǎn)錄增加可能是AIS患者CAM水平上升的原因之一。 2、GHR基因的I526L位點(diǎn)的純合基因型可能與AIS易感性相關(guān)。其多態(tài)性可能會(huì)影響GH/GHR/IGF-1軸的信號(hào)傳遞過程，從而產(chǎn)生三方面效應(yīng)：①GH水平反饋性升高，從而引起發(fā)育高峰前移；②骨骼的生長發(fā)育受到“微調(diào)”，參與AIS的發(fā)生；③骨密度降低。 3、GHR基因I526L位點(diǎn)的純合基因型(記為PP)與褪黑素受體基因1Br