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1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文喉癌切緣p53基因的突變研究姓名:蔡群峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師:任重2001.1.1GTGAT,110bp;P8A:TGGTAArCTACTGGGACGG,P8B:CTCGCTTAGTGCTCCCTGG,137bp實(shí)驗(yàn)方法1用常規(guī)酚氯仿法提取組織DNA。2PCR擴(kuò)增和PCRSSCP按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。3結(jié)果判定:根據(jù)切緣樣品PcR產(chǎn)物單鏈帶泳動(dòng)位置與正常對(duì)照的差異來(lái)判斷樣品中是否有突變;野生型p5
2、3的單鏈DNA位于同一水平上,突變型p53的單鏈DNA高于或低于野生型p53單鏈DNA的不同水平上。4臨床研究:所有喉癌患者術(shù)后定期復(fù)診隨訪,行問(wèn)接喉鏡和纖維喉鏡檢查,了解喉內(nèi)情況有無(wú)局部復(fù)發(fā),觀察切緣p53基因突變情況與喉癌術(shù)后局部切緣復(fù)發(fā)的關(guān)系。5統(tǒng)計(jì)學(xué)檢查:x2檢驗(yàn),P005為差異性顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1喉癌切緣組織p53基因的突變表達(dá)情況喉癌切緣組織p53基因突變率為214%(12/56),喉正常組織中無(wú)p53基因突變表達(dá)。2切緣p5
3、3基因突變與局部復(fù)發(fā)的關(guān)系喉癌切緣p53基因突變局部復(fù)發(fā)率為583%(7門2),而切緣無(wú)p53基因突變者無(wú)一例局部復(fù)發(fā)。3不同切緣距離與局部復(fù)發(fā)的關(guān)系經(jīng)檢驗(yàn)0咖~組與2哪~組之間,5姍~組與10姍~組之間局部復(fù)發(fā)率差異無(wú)顯著性:0咖~組、5舢~組之間局部復(fù)發(fā)率差異有顯著性,將切緣定于5柵,0刪~、2咖~為陽(yáng)性切緣,5咖~、10姍~為陰性切緣。4切緣口53基因突變與預(yù)后關(guān)系病人術(shù)后隨訪3年,切緣陽(yáng)性組死亡6例,陰性組死亡3例,Log_ra
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