冷凍和冷休克對精子生物學(xué)特性和線粒體膜電位的影響.pdf

1、低溫冷凍保存是目前進(jìn)行精子保存和體外受精試驗以及動物保種的關(guān)鍵技術(shù)，近年來也成為豬繁殖輔助技術(shù)中研究的重點內(nèi)容，可以進(jìn)行精液的長期冷凍保存，運輸與體外受精。本試驗的研究目的是為了探討冷凍和冷休克處理對豬精子生物學(xué)特性、線粒體膜電位(Mitochondrial inner transmembrane potential，△Ψm)、精子粘附性以及體外受精率的影響。使用的主要方法是微生物動（靜）態(tài)圖像檢測系統(tǒng)，計算機輔助精子精液分析(comp

2、uter assisted sperm analysis，CASA)和考馬斯亮藍(lán)染色方法、低滲膨脹方法(Low hypo-osmotic swelling test，HOST)，JC-1（Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1）染色，豬精子粘附性鏡檢等。經(jīng)過多次試驗研究得出以下結(jié)果:
　　1.CASA檢測-196℃凍融精子的質(zhì)量參數(shù)顯著高于-80℃凍融精子和冷休克處

3、理的精子;
　　2.-196℃凍融精子在進(jìn)行體外受精試驗時發(fā)育到二細(xì)胞期的比率好于-80℃凍融精子和冷休克處理的精子;
　　3.經(jīng)低滲HOST試驗，表明-196℃凍融精子的尾部卷曲比率與頂體完整性高于-80℃凍融精子和冷休克處理的精子;
　　4.-196℃凍融精子與卵母細(xì)胞的粘附力好于-80℃凍融精子和冷休克處理的精子;
　　5.25℃、-80℃和-196℃添加CLC組的精子線粒體膜電位（mitochondria