重慶市兒童α-和β-地中海貧血的分子流行病學研究.pdf

1、目的:α-和β-地中海貧血（簡稱地貧）是世界上最常見的常染色體隱性遺傳性疾病之一，是一組以α-或β-珠蛋白肽鏈合成減少或缺乏為特征的溶血性貧血，主要分布在全球瘧疾高發(fā)的熱帶和亞熱帶地區(qū)，在我國，多見于長江以南的廣大地區(qū)。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計，全球有近5億的人口攜帶有血紅蛋白變異基因，約占全球總?cè)藬?shù)的7％，其中約2.6億人是α-地貧基因攜帶者，有8000萬-9000萬人是β-地貧基因攜帶者。并且每年至少有30萬的重型地貧患兒出生。重型地中海

2、貧血為致死性疾病，在高發(fā)區(qū)給社會和家庭帶來了沉重的負擔，同時也嚴重威脅了高發(fā)區(qū)的人口質(zhì)量。目前針對重型地貧的治療方法有限，早期世界發(fā)達地區(qū)的實踐和經(jīng)驗已經(jīng)證實:在地貧高發(fā)區(qū)通過早期篩查及遺傳咨詢預防重型地貧患兒出生是最有效的解決方案。通過人群的分子流行病學調(diào)查了解本地區(qū)地貧的流行情況，對于地貧的防治具有重大意義。本研究的主要目的旨在闡明α-地貧和β-地貧在重慶市的發(fā)生率、突變類型及其頻率，為本地區(qū)開展地貧預防計劃提供理論依據(jù)。
　

3、　方法:按整群隨機抽樣方法，在重慶市隨機抽取3個城區(qū)，與入托體檢指定的婦幼保健院合作，進行連續(xù)隨機抽樣。共采集入托體檢兒童外周靜脈血標本1754例，抽取外周靜脈血1.5-2mlEDTA抗凝進行地貧篩查調(diào)查。對所選取的兒童進行問卷調(diào)查，包括性別、年齡、民族及籍貫等。采集的樣本進行血常規(guī)和血紅蛋白電泳分析。β-地貧表型陽性指標為:MCV＜80 fl和（或）MCH＜27 pg，Hb A2＞3.3％和（或）Hb F＞2％。β-表型陽性樣本首先進

4、行中國人常見的18種β-地貧基因突變檢測，表型陽性而未檢測出中國人已知突變基因型的標本進一步采用DNA測序法進行β-珠蛋白基因分析。
　　從1754例標本中隨機選取1057例進行α-地貧的分子流行病學調(diào)查。所有樣本均進行分子鑒定，采用采用實時熒光定量PCR的方法檢測α-珠蛋白基因拷貝數(shù)異常，同時Gap-PCR法檢測α地貧五種缺失型（--SEA、-α3.7、-α4.2、--FIL、--THAI），采用多重PCR技術(shù)α-珠蛋白基因多倍

5、體進行驗證，DNA測序法檢測α地貧的突變型。
　　結(jié)果:本研究共選取重慶市入托體檢兒童1754例，其中檢出25例β-地貧雜合子，1例β-地貧雙重雜合子，人群中β-地貧的基因攜帶率為1.43％。25例β-地貧攜帶者中，共檢出7種突變類型，最常見的4種依次是CD41-42(-CTTT)、IVS-Ⅱ-654(C→T)、CD17(AAG＞TAG)、βE(CD26，GAG＞AAG)，此四種突變型占全部突變基因的88.00％，是本地區(qū)的主要突

6、變種類。此外，我們還發(fā)現(xiàn)5'UTR;+(43-40)(-AAAC)1種國內(nèi)少見突變類型，并首次在中國人中發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白病Hb Zurich。
　　1057例兒童外周血標本中共檢出α-地貧基因攜帶者55例，其等位基因55個，故α-地貧的基因攜帶率為5.20％。55例α-地貧基因攜帶者中，共檢出5種缺失型α-地貧，其中最常見的三種及構(gòu)成比依次為:-3.7缺失型（-α3.7)54.55％、東南亞缺失型（--SEA）18.18％和-4.

7、2缺失型（-α4.2）9.08％;檢出8種非缺失型α-地貧，包括一例Hb Quong Sze和7例α珠蛋白基因新突變。另外檢出α-三聯(lián)體(ααα)24例，人群基因攜帶率為2.55％。本研究中，我們還發(fā)現(xiàn)2例發(fā)生在α珠蛋白基因上的異常血紅蛋白病Hb J-Wenchang-Wuming和Hb Arya。經(jīng)文獻檢索證實，Hb Arya是首次在中國人種中發(fā)現(xiàn)并報道的。
　　結(jié)論:本研究闡明了重慶市α-和β-地貧的人群攜帶率和詳細的基因突變