地塞米松對(duì)順鉑引起的人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1凋亡的抑制作用及其分子機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的：研究地塞米松(DEX)對(duì)順鉑(CDDP)引起的人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1凋亡的抑制作用及探討其初步的分子機(jī)制。 方法：采用人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1，分別加入不同濃度的DEX體外誘導(dǎo)培養(yǎng)，24小時(shí)后加入不同濃度的CDDP繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的存活率；再用1μmol/LDEX刺激SPC-A1細(xì)胞，分別于1hr、2hr、4hr、6hr、12hr提取細(xì)胞的總RNA：采用半定量RT-PCR技術(shù)，檢測(cè)SPC-A1細(xì)胞中的

2、血清/糖皮質(zhì)激素-誘導(dǎo)激酶(SGK-1)和有絲分裂原蛋白激酶(MKP-1)的表達(dá)：同時(shí)用生物素標(biāo)記的抗糖皮質(zhì)激素受體(GR)抗體對(duì)SPC-A1細(xì)胞行免疫組化染色來檢測(cè)GR的表達(dá)。 結(jié)果：SPC-A1細(xì)胞經(jīng)DEX誘導(dǎo)后，對(duì)CDDP所致的凋亡有抵抗作用并與DEX濃度呈劑量依賴關(guān)系。DEX刺激后的SPC-A1細(xì)胞表達(dá)SGK-1，在12hr時(shí)表達(dá)達(dá)高峰；細(xì)胞免疫組化顯示SPC-A1細(xì)胞經(jīng)DEX刺激后GR上調(diào)，細(xì)胞內(nèi)GR表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)明